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冷凍保護劑的品質:
1):DMSO應為試劑級等級,無菌且無色(以0.22 micronFGLP flon 過濾或直接購買無菌產品,如Sigma D-2650),以5-10 ml 小體積分裝,4℃避光保存,勿作多次解凍。
(ARO細胞信息:貼壁細胞 來源:通派細胞庫 培養基、血清:90% RPMI-1640、10% 胎牛血清)
2):Glycerol 亦應為試劑級等級,以高壓蒸汽滅菌后避光保存。在開啟后一年內使用,因長期儲存后對細胞會有毒性。
研究發現艾滋病病毒往往會通過鎖定患者體內CCR5蛋白的方式,對一種名為CD+4 T的細胞展開攻擊,破壞人類免疫系統,但這種感染過程在一小部分歐洲人身上的進展卻極為緩慢。
(人HUH7細胞 來源:通派細胞庫 人肝癌細胞)
原因是其體內與CCR5相關的基因發生了突變,產生了一種名為CCR5Δ32的副本。具備這種突變基因的人對艾滋病病毒具有天然的抵抗力。獲得這一發現后,用干細胞移植的方法,將這種突變基因轉入艾滋病患者體內,達到治愈艾滋病的目的。
(人Hep-3B2.1-7細胞 Hep3B細胞 來源:通派細胞庫 人肝癌細胞)
新研究的目標就是要在無需CCR5Δ32基因捐獻者的情況下,實現同樣的效果。借助第三代基因編輯技術CRISPR-Cas9系統,在ips細胞中插入CCR5Δ32基因片段,而后將其培育成白細胞。
(人MG63細胞 來源:通派細胞庫 人骨肉瘤細胞)
與傳統基因編輯技術相比,新技術效率更高,在插入位置上也更為。物理學家組織網6月11日報道稱,目前簡悅威的小組已經證明,CRISPR-Cas9系統能夠有效地進行基因編輯工作。實驗結果證實培育出的具有CCR5Δ32基因片段的白細胞的確能夠免受艾滋病病毒的感染。
(人143B細胞 來源:通派細胞庫 人骨肉瘤細胞)
還未將這些經過基因編輯的iPS細胞培育成CD+4 T這樣特殊類型的白細胞。在細胞類型轉換和移植上,還有很多因素需要考慮,距臨床應用還有很長的一段路要走。但可以肯定的是,該成果為艾滋病的治療帶來了一種新可能。
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