細胞：HFLS-RA細胞
中文名稱：人類風濕關節炎成纖維樣滑膜細胞
生長特性：貼壁細胞
培養基：DMEM-H +10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件：50%基礎培養基、40% FBS、10% DMSO
細胞常規培養傳代流程( 請嚴格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養瓶中的培養基，PBS 緩沖液潤洗細胞兩次，加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進行消化細胞(注意把握消化時間，通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰_酶，加 6~8ml 培養基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落，吹散。
3. 取部分細胞懸液轉移到新的培養皿/瓶中，添加適當的培養基，把細胞懸液打勻，于培養箱中培養。
4. 注意培養基 PH 值變化情況，定期換液(每周 2-3 次)，待細胞密度達到 80%以后重復 1 項操作或凍存。
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內毒素所致SIRSMODS小鼠脾細胞損傷的形態學觀察
目的應用大腸桿菌內毒素脂多糖(LPS)腹腔注射制備小鼠全身炎癥反應綜合征/多器官功能失常綜合征(SIRS/MODS)模型.
方法:
用免疫組化的方法檢測了Bcl-2的表達.
結果隨LPS作用時間的延長,脾損傷逐漸加重.HE染色中,生發中心和動脈周圍淋巴鞘分別在LPS注射后9小時和18小時出現大量深淺不一的顆粒狀細胞碎片.
TUNEL陽性染色細胞隨時間延長而增多.電鏡下可見到凋亡的淋巴細胞.在18小時還見到細胞壞死現象.
Bcl-2的表達隨著LPS作用時間的延長而明顯下降,與TUNEL染色的相關分析表明,Bcl-2的表達與細胞凋亡有顯著的負相關.
結論在LPS所致的SIRS/MODS模型中,脾細胞損傷以凋亡為主,隨LPS作用時間延長而加重,在晚期還會出現細胞壞死.Bcl-2參與了LPS引起的脾細胞凋亡效應.
