細胞：Capan-1細胞
中文名稱：人胰腺癌細胞
生長特性：貼壁細胞
培養(yǎng)基：IMDM+20%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請嚴格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS 緩沖液潤洗細胞兩次，加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進行消化細胞(注意把握消化時間，通?？刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰_酶，加 6~8ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落，吹散。
3. 取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當?shù)呐囵B(yǎng)基，把細胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況，定期換液(每周 2-3 次)，待細胞密度達到 80%以后重復 1 項操作或凍存。
(網(wǎng)絡信息主針對網(wǎng)絡推廣作用，僅供參考，細胞培養(yǎng)請咨詢細胞庫管理員，以細胞庫管理員提供給您的信息為準，操作前，如果有不明白之處，先咨詢細胞庫管理員，避免不必要的損失；)
Ser294的磷酸化對PI4KIIIβ功能有什么作用？
磷酸化位點的突變使得PI4KIIIβ的脂激酶活性降低了60%。另外，與激酶失活的PKD突變體的顯性失活效應相統(tǒng)一的，過量表達激酶死亡PKD1降低了PI4KIIIβ的脂激酶活性。
突變也降低了熒光標記的分泌型蛋白質(zhì)從TGN到細胞表面的運輸效率。PI4KIII的過量表達增加了標記蛋白到達細胞表面的數(shù)量。
總結(jié)起來，這些結(jié)果表明蛋白激酶和脂激酶對于分泌型蛋白運輸過程都非常重要。
科研人員認為，PKD在TGN的功能就像是“瓶頸”一樣進行調(diào)控：通過促使參與載體囊泡形成的蛋白質(zhì)磷酸化，來控制分泌型分子的運輸。
PI4KIIIβ是這些底物中的一員，通過PKD介導的磷酸化增強了它的脂激酶活性。這個過程進而增加了TGN膜中的PI(4)P數(shù)量。
因為PI(4)P數(shù)量和膜結(jié)合的ADP-核糖基化因子，被認為是介導載體囊泡形成的重要成員。接下來，對于研究者們的挑戰(zhàn)將會是闡明載體囊泡形成的精確機制。
