細胞：NCTC2472細胞
中文名稱：小鼠纖維肉瘤細胞
生長特性：貼壁細胞
培養(yǎng)基：DMEM-H +10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件：50%基礎培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請嚴格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS 緩沖液潤洗細胞兩次，加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進行消化細胞(注意把握消化時間，通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰_酶，加 6~8ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落，吹散。
3. 取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當?shù)呐囵B(yǎng)基，把細胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況，定期換液(每周 2-3 次)，待細胞密度達到 80%以后重復 1 項操作或凍存。
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光遺傳學涉及到對神經(jīng)元進行遺傳修飾，使其產(chǎn)生一種光敏蛋白，當暴露在光照中時就會發(fā)送電信號。到目前為止光遺傳學技術主要被用于研究大腦如何工作。
探索將其作為一種治療手段的可行性，但對大腦進行不可逆的基因操控所引發(fā)的擔憂成為他們面臨的最大障礙。
在實驗室里修改了小鼠的干細胞，然后將它們移植到小鼠的腿部神經(jīng)中。這樣做的目的是，一旦有問題出現(xiàn)，移植的干細胞能夠更容易被去除。
研究在小鼠胚胎干細胞中插入了編碼光響應蛋白的藻類基因，通過添加信號分子，使干細胞發(fā)育成負責讓信號在脊髓和身體其他部位來回傳遞的運動神經(jīng)元。
接下來這些神經(jīng)元被植入自身神經(jīng)已被切斷的小鼠的坐骨神經(jīng)。待5周后植入神經(jīng)元與肌肉融合，研究對小鼠實施了麻醉，剖開其皮膚，并用藍色脈沖光照射神經(jīng)。他們觀察到，小鼠腿部肌肉產(chǎn)生了收縮反應。
目前大部分正在開發(fā)的針對癱瘓病人的治療方法都需要對他們的神經(jīng)或肌肉進行電刺激。如果患者的痛神經(jīng)元仍能工作，這可能給他們帶來痛苦。此外，電刺激會使肌肉收縮過于用力，很快出現(xiàn)肌肉疲勞。而光遺傳學方法對肌纖維的刺激則更為平緩。
為了讓這項技術更適用于人體，研究正在開發(fā)一種護腕形式的發(fā)光二極管，其可與皮膚下的微型電池組相連，作用于周圍神經(jīng)。他們還試圖用患者皮膚培育的誘導多能干細胞(iPS細胞)來替代胚胎干細胞，這樣患者就無需借助藥物來抑制免疫反應。
目標是幫助那些無力控制呼吸肌的運動神經(jīng)元病人。正在研制一個可以反復照亮胸膈神經(jīng)的心臟起搏器，并計劃在豬身上進行測試，希望用它恢復豬的呼吸能力。
