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初級(jí)會(huì)員 | 第10年

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NRK-52E細(xì)胞 大鼠腎小管上皮細(xì)胞

時(shí)間:2024/12/15閱讀:182
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  細(xì)胞:NRK-52E細(xì)胞
 
  中文名稱:大鼠腎小管上皮細(xì)胞
 
  生長特性:貼壁細(xì)胞
 
  培養(yǎng)基:1640 培養(yǎng)基  血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
 
  凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
 
  細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請嚴(yán)格遵照無菌操作)
 
  1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤洗細(xì)胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通常控制在 1-2min)
 
  2. 鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散。
 
  3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
 
  4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
 
  (網(wǎng)絡(luò)信息主針對網(wǎng)絡(luò)推廣作用,僅供參考,細(xì)胞培養(yǎng)請咨詢細(xì)胞庫管理員,以細(xì)胞庫管理員提供給您的信息為準(zhǔn),操作前,如果有不明白之處,先咨詢細(xì)胞庫管理員,避免不必要的損失;)
 
  干細(xì)胞培育環(huán)境影響干細(xì)胞分化
 
  在紫外光照射下,這種凝膠會(huì)軟化,這使得研究能夠改變底物的硬度,且無需分離及轉(zhuǎn)移細(xì)胞至新環(huán)境。發(fā)現(xiàn)細(xì)胞在硬底物上培養(yǎng)一天然后恢復(fù)至軟表面培養(yǎng)后,RUNX2會(huì)“失活”從細(xì)胞核重定位到細(xì)胞質(zhì)。
 
  (人MDA-MB-435S細(xì)胞 來源:通派細(xì)胞庫 人乳癌細(xì)胞)
 
  然而如果細(xì)胞在硬底物上培養(yǎng)10天再轉(zhuǎn)換為軟底物,之后的10天時(shí)間里RUNX2仍在細(xì)胞核中活化。當(dāng)檢測YAP激活時(shí)看到了相似的結(jié)果。在硬底物上度過的時(shí)間越長,細(xì)胞于軟表面培養(yǎng)時(shí)YAP活化的時(shí)間也相應(yīng)延長。
 
  (人M14細(xì)胞 來源:通派細(xì)胞庫 人黑色素瘤細(xì)胞)
 
  研究結(jié)果還具有實(shí)用意義。如果一種體外培養(yǎng)過程能夠無意中誘導(dǎo)細(xì)胞某方面活化……它們有可能不會(huì)像研究人員所猜測的那樣運(yùn)轉(zhuǎn)。這無疑增加了我們關(guān)于體外應(yīng)該如何培養(yǎng)干細(xì)胞的認(rèn)識(shí)。
 
  (人M4A4細(xì)胞 來源:通派細(xì)胞庫 人乳癌細(xì)胞)
 
  RUNX2、YAP以及其他的一些改變與細(xì)胞在硬材料上度過的時(shí)間相關(guān),但這樣的關(guān)聯(lián)未必確定證實(shí)了這些改變的原因。
 

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