細胞:H4細胞
中文名稱:人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞
生長特性:貼壁細胞
培養(yǎng)基:1640 培養(yǎng)基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
H4細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請嚴格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤洗細胞兩次,加 2-3 ml 0.25% yi酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉yi酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散。
3. 取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細胞密度達到 80%以后重復(fù) 1 項操作或凍存。
(網(wǎng)絡(luò)信息主針對網(wǎng)絡(luò)推廣作用,僅供參考,細胞培養(yǎng)請咨詢細胞庫管理員,以細胞庫管理員提供給您的信息為準(zhǔn),操作前,如果有不明白之處,先咨詢細胞庫管理員,避免不必要的損失;)
哺乳動物缺失模型對miRNA靶標(biāo)研究有效
miRNAs是一種21-25nt長的單鏈小分子RNA,對于它的研究起始于時序調(diào)控小RNA(stRNAs),由于miRNAs在物種進化中相當(dāng)保守
在植物、動物和真菌中發(fā)現(xiàn)的miRNAs只在特定的組織和發(fā)育階段表達,(人AU565細胞 來源:通派細胞庫 人乳癌細胞)而且這種特異性和時序性,決定了組織和細胞的功能特異性,表明miRNA在細胞生長和發(fā)育過程的調(diào)節(jié)過程中起多種作用,因此miRNA的研究受到了生物學(xué)家的廣泛關(guān)注。
但是經(jīng)過了前期的研究,(人HMSC細胞 來源:通派細胞庫 人間充干細胞)有關(guān)哺乳動物體內(nèi)特異性miRNAs靶向刪除必要性仍然知之甚少,并對于mRNA靶標(biāo)的可靠預(yù)測依然存在問題
研究人員提出miRNA生物生成對于小鼠心臟發(fā)生而言是必需的,(人HPDLF細胞 來源:通派細胞庫 人牙髓成纖維細胞)而且在對肌肉特異性miRNA:miR-1-2的研究中,他們發(fā)現(xiàn)miR-1-2參與扮演的角色眾多,包括心肌形態(tài)形成(cardiac morphogenesis),電傳導(dǎo),細胞周期調(diào)控。
進一步對miR-1互補序列進行分析,(人Calu-3細胞 來源:通派細胞庫 人肺腺癌細胞 )發(fā)現(xiàn)了一個miR-1匹配點(seed matches)富集區(qū),以及miR-1潛在結(jié)合位點定位在物理性可接觸區(qū)域的一種傾向。
這些發(fā)現(xiàn)說明miRNA數(shù)量的精細差別在哺乳動物中有重要的影響,并且哺乳動物缺失模型在miRNA靶標(biāo)研究方面的有效性。