細胞:MA-104細胞
中文名稱:恒河猴腎細胞
生長特性:貼壁細胞
培養(yǎng)基:1640 培養(yǎng)基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
MA-104細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請嚴格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤洗細胞兩次,加 2-3 ml 0.25% yi酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉yi酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散。
3. 取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當?shù)呐囵B(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細胞密度達到 80%以后重復 1 項操作或凍存。
(網(wǎng)絡信息主針對網(wǎng)絡推廣作用,僅供參考,細胞培養(yǎng)請咨詢細胞庫管理員,以細胞庫管理員提供給您的信息為準,操作前,如果有不明白之處,先咨詢細胞庫管理員,避免不必要的損失;)
Smad5雙等位基因剔除ES細胞的建立及其初步研究
Smad5是TGF-信號的細胞質(zhì)內(nèi)信號轉(zhuǎn)導分子. Smad5的定位剔除導致小鼠胚胎期死亡.
(通派細胞庫供應:HCT-8細胞)
為了進一步研究Smad5在組織器官發(fā)育中的功能, 利用同源重組技術(shù)獲得了Smad5雙等位基因剔除的胚胎干(ES)細胞. (通派細胞庫供應:SK-N-BE(2)細胞)
首先利用Cre-LoxP系統(tǒng)刪除了Smad5中靶ES細胞的抗性基因, 再用相同的打靶載體進行轉(zhuǎn)染, 經(jīng)southern雜交篩選獲得了Smad5雙等位基因剔除的ES細胞. (通派細胞庫供應:COLO 205細胞)
嵌合體研究的結(jié)果表明, Smad5在心臟和神經(jīng)管的正常發(fā)育中可能起重要的作用. (通派細胞庫供應:CoLo-TC細胞)
Smad5雙等位基因剔除ES細胞在裸鼠皮下可以形成畸胎瘤, 并可分化成包括神經(jīng)細胞、肌肉細胞、軟骨細胞、內(nèi)皮細胞等在內(nèi)的多種細胞, (通派細胞庫供應:Beta-TC-6細胞)因而Smad5雙等位基因剔除的ES細胞可用于研究Smad5介導的TGF-信號在多種組織器官發(fā)育和ES細胞體外定向分化中的作用.