細胞:Li-7細胞
中文名稱:人肝癌細胞
生長特性:貼壁細胞
培養基:1640 培養基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎培養基、40% FBS、10% DMSO
Li-7細胞常規培養傳代流程( 請嚴格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養瓶中的培養基,PBS 緩沖液潤洗細胞兩次,加 2-3 ml 0.25% yi酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉yi酶,加 6~8ml 培養基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散。
3. 取部分細胞懸液轉移到新的培養皿/瓶中,添加適當的培養基,把細胞懸液打勻,于培養箱中培養。
4. 注意培養基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細胞密度達到 80%以后重復 1 項操作或凍存。
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SOX2在人胚胎干細胞和神經祖細胞命運決定中的作用機制
人的胚胎干細胞能夠無限自我更新并具有分化全能性,即在體外特定培養條件下能夠分化為來自三胚層的各種細胞類型,因而為疾病的細胞治療提供了新的希望。(通派細胞庫供應:alpha TC1 clone 6細胞)
目前,人的胚胎干細胞和誘導性多能干細胞已經成功地被應用于神經系統各類細胞的定向分化,(通派細胞庫供應:K7M2 wt細胞)例如神經干/祖細胞和神經元等,為神經系統疾病的細胞治療奠定了基礎。
然而要高效安全地實現hESCs和hNPCs的定向分化,充分利用hESCs和hNPCs的潛能,(通派細胞庫供應:TT細胞)首先必須清楚地認識hESCs和hNPCs自我更新和特性維持的調控網絡。
ESCs和NPCs有一個共同的命運決定因子SOX2,(通派細胞庫供應:Calu-1細胞)它既維持ESCs自我更新又能促進神經系統發育和NPCs的維持,因其功能多樣性而備受科研界的矚目。
Sox2對于小鼠胚胎的存活,滋養層和內細胞團的分離,(通派細胞庫供應:MLO-Y4細胞)小鼠ESCs的建系和體外培養維持的作用,同時它還能促進神經系統的發育,維持大腦內的NSCs/NPCs數目,保證神經元正常分化。
然而長期以來,大部分的研究都將研究范疇局限于Sox2在模式動物ESCs和神經系統中的功能,(通派細胞庫供應:HCC827細胞)而關于這一重要的核心全能性因子在hESCs和hESCs分化而來的hNPCs中的功能和作用機制研究甚少且存在爭議,且SOX2是如何促進ESCs向神經分化的,其促神經下游基因有哪些都是亟待回答的重要問題。
通過ChIP-seq,RNA-seq和蛋白質譜等手段,(通派細胞庫供應:LS 174T細胞)全面比較分析了SOX2在hESCs和hNPCs中的轉錄調控網絡和蛋白質相互作用網絡。