細(xì)胞:HUV-EC-C細(xì)胞
中文名稱(chēng):人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞
生長(zhǎng)特性:貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基:F12K+10%FBS+40ug/ml ECGS+0.1mg/ml肝素na(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
HUV-EC-C細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次,加 2-3 ml 0.25% yi酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉yi酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
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PNAS骨髓干細(xì)胞不能作為修復(fù)肌細(xì)胞的替代物
采自骨髓的干細(xì)胞;推測(cè)細(xì)胞可以使血液流到患病的器官上,替換受損的組織。(通派細(xì)胞庫(kù)供應(yīng):PC12細(xì)胞)但是最近發(fā)現(xiàn)了一個(gè)結(jié)果:盡管細(xì)胞可以轉(zhuǎn)移到肌肉纖維處,但是它們不能行使任何組織功能。
因此骨髓干細(xì)胞可能不能作為修復(fù)肌細(xì)胞的替代物。(通派細(xì)胞庫(kù)供應(yīng):GH3-T細(xì)胞)有助于治療心臟病的骨髓干細(xì)胞,并不像人們以前認(rèn)為的那樣能夠直接分化成心肌細(xì)胞。
之前人們預(yù)測(cè)干細(xì)胞可能成為身體內(nèi)的萬(wàn)能修復(fù)者,(通派細(xì)胞庫(kù)供應(yīng):CWR22RV1細(xì)胞)現(xiàn)在認(rèn)為我們不應(yīng)該對(duì)這種說(shuō)法抱以太大的希望。利用放射學(xué)方法,研究人員將導(dǎo)入的骨髓干細(xì)胞先摧毀,然后替換基因改造的可以發(fā)熒光的細(xì)胞。
一段時(shí)間后,他們發(fā)現(xiàn)綠色熒光出現(xiàn)在小鼠的腦神經(jīng)細(xì)胞中。(通派細(xì)胞庫(kù)供應(yīng):DU145細(xì)胞)表明在血液中循環(huán)的干細(xì)胞可以轉(zhuǎn)移到神經(jīng)組織里。這似乎是一種嶄新的治療機(jī)制:通過(guò)血液循環(huán)中的干細(xì)胞。
我們身體本身就有負(fù)責(zé)修復(fù)細(xì)胞,一些嚴(yán)重的疾病如:(通派細(xì)胞庫(kù)供應(yīng):LNCAP細(xì)胞)杜興肌營(yíng)養(yǎng)不良也有可能通過(guò)一直健康的骨髓干細(xì)胞治愈。
患有這種病的孩童肌肉無(wú)法正常產(chǎn)生一種叫dystrophin的蛋白。(通派細(xì)胞庫(kù)供應(yīng):PC-3細(xì)胞)研究通過(guò)移植熒光標(biāo)記的骨髓干細(xì)胞進(jìn)入患有杜興肌營(yíng)養(yǎng)不良的小鼠。
移植后骨髓干細(xì)胞可以在小鼠體內(nèi)存在數(shù)月,(通派細(xì)胞庫(kù)供應(yīng):A375細(xì)胞)并且對(duì)肌肉的情況有了顯著改善。下一步,研究人員希望可以檢測(cè)到骨髓干細(xì)胞分化成為肌細(xì)胞,產(chǎn)生dystrophin,但是另人失望的是實(shí)驗(yàn)結(jié)果是陰性的。
雖然細(xì)胞可以和缺陷的肌肉結(jié)合,(通派細(xì)胞庫(kù)供應(yīng):SH-SY5Y細(xì)胞)但是干細(xì)胞仍然處于沉默的水平,因?yàn)樗鼈兿蚣∪饧?xì)胞發(fā)展的程序已經(jīng)被關(guān)閉。嘗試?yán)没瘜W(xué)物質(zhì)激活這種開(kāi)關(guān),但是干細(xì)胞表達(dá)dystrophin的水平仍是十分低的。
過(guò)去,骨髓干細(xì)胞被看作一個(gè)萬(wàn)能修復(fù)者,像一個(gè)橡皮泥,(通派細(xì)胞庫(kù)供應(yīng):B16 ( C57BL)細(xì)胞)哪里有缺陷它都可能分化成缺陷組織細(xì)胞進(jìn)行修復(fù)。但是現(xiàn)在科學(xué)家認(rèn)為我們對(duì)這種萬(wàn)能修復(fù)者的期望似乎要有所下降了;