細胞:M2-10B4細胞
中文名稱:小鼠骨髓基質細胞
生長特性:貼壁細胞
培養基:1640 培養基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎培養基、40% FBS、10% DMSO
M2-10B4細胞常規培養傳代流程( 請嚴格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養瓶中的培養基,PBS 緩沖液潤洗細胞兩次,加 2-3 ml 0.25% yi酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉yi酶,加 6~8ml 培養基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散。
3. 取部分細胞懸液轉移到新的培養皿/瓶中,添加適當的培養基,把細胞懸液打勻,于培養箱中培養。
4. 注意培養基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細胞密度達到 80%以后重復 1 項操作或凍存。
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一個重要的科學謎團就是未成熟造血干細胞如何(和為什么)啟動形成某種細胞所需的基因表達,而不是向著另外一條路線發展。知道這個控制關鍵轉錄因子的路線對了解不同干細胞如何形成特定細胞具有重要意義。
CCD-18Co細胞:貼壁細胞 通派細胞庫培養條件:90% DMEM高糖、10% FBS
研究組利用他們和氣體研究人員的研究發現構建了這樣的一個系統。該研究組之前確定出轉錄因子PU.1是觸發骨髓祖細胞發育的一個關鍵基因開關。
BJ細胞:貼壁細胞 通派細胞庫培養條件:90% DMEM高糖、10% FBS
氣體的研究人員確定出一個叫做C/EBPα的轉錄因子是另外的一個發育開關。 但是這兩個開關如何工作還不清楚。這種轉錄因子在巨噬細胞和嗜中性粒細胞中的水平都很高。它們似乎都能直接活化巨噬細胞或嗜中性粒細胞的基因。
BGC-823細胞:貼壁細胞 通派細胞庫培養條件:90% RPMI-1640、10% FBS
嗜中性粒細胞中的巨噬細胞基因也處于關閉狀態。那么,這些巨噬細胞和嗜中性粒細胞基因如何利用相同的一套基本調節因子來產生特定的基因表達模式呢?