人25羥基維生素D（25-OH-VD）ELISA檢測試劑盒

檢測原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA） 。往預(yù)先包被25羥基維生素D（25-OH-VD）抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并*洗滌。
用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。 顏色的深淺和樣品中的25羥基維生素D（25-OH-VD）呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值） ，計算樣品濃度。
樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心 30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
自備物品
1. 酶標儀（450nm）
2. 高精度加樣 器 及 槍頭 ：0.5-10uL 、2-20uL 、20-200uL 、
200-1000uL
3. 37℃恒溫箱
操作注意事項
1. 試劑盒保存在 2-8℃，使用前室溫平衡 20 分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結(jié)晶，這屬于正常現(xiàn)象，水浴加熱使結(jié)晶*溶解后再使用。
2. 實驗中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中， 密封 （低溫干燥） 保存。
3. 濃度為 0 的 S0 號標準品即可視為陰性對照或者空白；按照說明書操作時樣本已經(jīng)稀釋 5 倍，zui終結(jié)果乘以 5 才是樣本實際濃度。
4. 嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。
5. 所有液體組分使用前充分搖勻。

深圳子科生物科技有限公司自產(chǎn)研發(fā)生產(chǎn)人25羥基維生素D（25-OH-VD）ELISA檢測試劑盒，詳細說明書見附件！