小鼠過敏毒素/補體片斷4a（C4a）ELISA試劑盒本試劑盒僅供課題研究使用
自備材料：
1. 蒸餾水。
2. 加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
3. 振蕩器及磁力攪拌器等。
 
樣品收集、處理及保存方法：
1、 血清……操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血紅細胞迅速小心地分離。
2、 血漿……EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、 細胞上清液……1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4、 組織勻漿……將組織加入適量理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液。
5、 保存……如果樣品不立即使用，應將其分成小部分-70℃保存，避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
 小鼠過敏毒素/補體片斷4a（C4a）ELISA試劑盒
操作注意事項：
● 試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
● 實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。
● 不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
● 使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。
● 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
● 底物A應揮發，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
● 加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
● 按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
 
安全性： 
1. 避免直接接觸終止液和底物A、B，一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。
2. 實難中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
小鼠過敏毒素/補體片斷4a（C4a）ELISA試劑盒 
試劑的準備：
1. 標準品：標準品的系列稀釋應在實驗時準備，不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進行：
500pg/ml（6號標準品）  原倍濃度不用稀釋直接加入50ul
250pg/ml（5號標準品）  100ul的原倍標準品加入100ul的標準品稀釋液
125pg/ml（4號標準品）  100ul的5號標準品加入100ul的標準品稀釋液
62.5pg/ml（3號標準品）  100ul的4號標準品加入100ul的標準品稀釋液
31.2pg/ml（2號標準品）  100ul的3號標準品加入100ul的標準品稀釋液
15.6pg/ml（1號標準品）  100ul的2號標準品加入100ul的標準品稀釋液
0pg/ml   （空白對照）   原倍濃度不用稀釋直接加入50ul
2. 洗滌緩沖液（50×）的稀釋：蒸餾水50倍稀釋。
 
試劑盒性能： 
1. 靈敏度：zui小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.990。
2. 特異性：不與其它細胞因子反應。
3. 重復性：板內、板間變異系數均小于10%。

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