一、各種蛋白染色方法的靈敏度比較
染色方法靈敏度與質譜的兼容性Silver1- 10ng-Silver (MS compatible)10ng+Comassie G -250 or R-250>30ng+antibody(western blot)1ng-
二、考馬斯亮藍染色
CBB 染色液：0.5%考馬斯亮藍 G250 或 R250;40%甲醇;10%乙酸;將 CBB 溶于甲醇中并不停的攪拌 15min。
加入乙酸與 ddH2O 脫色液：30%甲醇;10%乙酸
染色方法：1. 在搖床上染色 30min;2. 脫色至蛋白點或條帶清晰可見;3. ddH2O 洗 3-5 次。
三、膠體考馬氏亮藍染色 ColloidalCoomassie Staining(Cambridgecentrefor porteomics)
sensitivity = ~100ng
1. 固定：甲醇/ 醋酸/H2O(45:1:54)至少 20min.
2. 染色 12-18hr。
染色液： 17% (w/v) 硫酸銨;34%甲醇;0.5%醋酸;0.1% (w/v) CoomassieG250。
3. 脫色：用 H2O 脫色至蛋白點和背景清晰.
