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當(dāng)前位置:上海永葉生物科技有限公司>>技術(shù)文章>>無(wú)需高壓滅菌的瓊脂類(lèi)培養(yǎng)基的配制方法
目前培養(yǎng)基的主要滅菌方式有濕熱高壓滅菌、過(guò)濾除菌、加熱滅菌等。高壓滅菌為zui常用的滅菌方式,但也有部分培養(yǎng)基無(wú)需高壓滅菌,只需煮沸滅菌即可,如XLD瓊脂、SS瓊脂等。針對(duì)此類(lèi)培養(yǎng)基,特作出如下說(shuō)明。
本公司的培養(yǎng)基標(biāo)簽用法中有時(shí)會(huì)寫(xiě)“稱(chēng)取本品Xg,加熱攪拌溶解于1000ml蒸餾水中……無(wú)需高壓滅菌”字樣,并未寫(xiě)需要多少度滅菌多少分鐘,此時(shí)就需要注意不要用高壓滅菌鍋將培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌,否則就不得不重新配制了。
正確的滅菌方式應(yīng)為:
1、水浴加熱溶解:
使用玻璃容器即可。稱(chēng)取適量干粉培養(yǎng)基加入蒸餾水中,置于沸水浴中,在水浴加熱的過(guò)程中時(shí)常攪拌或搖動(dòng)培養(yǎng)基使之受熱均勻,約25min~30min后可以看到培養(yǎng)基的內(nèi)部是澄清透亮的,無(wú)瓊脂粒的存在,此時(shí)就可以冷卻至所需溫度傾注平皿。
2、電磁爐加熱溶解:
使用耐電磁爐加熱的容器(如搪瓷缸)。稱(chēng)取適量干粉培養(yǎng)基加入蒸餾水中,將搪瓷缸放在電磁爐的*,打開(kāi)電磁爐開(kāi)關(guān),開(kāi)始加熱,用玻璃棒持續(xù)攪拌培養(yǎng)基以防底部焦糊,約1-2分鐘之后,培養(yǎng)基開(kāi)始沸騰,產(chǎn)生了大量泡沫狀物質(zhì)并上涌,此時(shí)迅速將搪瓷缸拿開(kāi)(以防飛濺出來(lái)),待泡沫消掉之后(約十幾秒鐘),再將搪瓷缸放上,沸騰起泡沫后再次拿開(kāi),如此反復(fù)使培養(yǎng)基沸騰4遍即可(如還有明顯瓊脂粒未溶解,可加沸一次),冷卻至所需溫度傾注平皿。
3、電爐加熱溶解:
使用耐加熱的玻璃制品。此方法與方法2的過(guò)程一致,使培養(yǎng)基沸騰4遍即可。
注意事項(xiàng):
1、 此方法實(shí)驗(yàn)室配制培養(yǎng)基使用。
2、 配制量不宜過(guò)多,建議配制量在500ml以下,配制的培養(yǎng)基體積建議在容器體積的60%以下。
3、 操作時(shí)需做好防護(hù),如戴上棉手套,以防不小心燙傷。
4、 使用電爐加熱時(shí)需注意防止玻璃容器受熱后碎裂。
5、 工業(yè)化生產(chǎn)工藝需自行進(jìn)行摸索。
6、 此方法的zui終解釋權(quán)歸青島高科技工業(yè)園海博生物技術(shù)有限公司所有。
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