細(xì)胞培養(yǎng)中細(xì)胞生長緩慢-問題分析
就一個實(shí)驗室來說,無論它運(yùn)作多么好,總會因為招募新人、革新技術(shù)或拓展方向而影響原來的流程,從而產(chǎn)生各種各樣的新問題。解決這些問題的一個方法就是確保原先操作規(guī)程不發(fā)生任何變化,即規(guī)范標(biāo)準(zhǔn)操作程序(SOPs),且不經(jīng)嚴(yán)格*地考證后不輕易改變SOPs。然而,這樣做往往非常困難,特別是針對科學(xué)研究。科學(xué)本身的生命力就在于不斷變革研究內(nèi)容,拓展研究領(lǐng)域,更新研究方法。
當(dāng)細(xì)胞生長緩慢時,先確定實(shí)驗室中只有你個人培養(yǎng)體系有這種問題,還是其他研究人員也遇到同樣的問題?
如果此問題只發(fā)生在你的培養(yǎng)基體系,檢查你所培養(yǎng)的細(xì)胞是否存在污染。檢查你用于培養(yǎng)細(xì)胞的培養(yǎng)基和血清(如是否批次不同或廠商不同)。如果你平常使用的是粉劑或10*儲存液,而現(xiàn)在購買的培養(yǎng)基更換為1*液體,而隨后證明問題就出現(xiàn)在此,處理方法參見關(guān)于培養(yǎng)基的部分。
如果問題與培養(yǎng)基無關(guān),那么很可能還是細(xì)胞的問題。
如果問題出在你所培養(yǎng)細(xì)胞的本身,復(fù)蘇另一支凍存的細(xì)胞,并且與正在培養(yǎng)的細(xì)胞加以比較。兩種細(xì)胞的培養(yǎng)應(yīng)分開,以免在培養(yǎng)之初就產(chǎn)生污染。隨后做如下檢查:細(xì)胞保藏制度-計數(shù)傳代培養(yǎng)的細(xì)胞,并繪制生長曲線,與以前培養(yǎng)該細(xì)胞的資料進(jìn)行比較,檢查是否有下列因素:傳代時是否接種密度過低;細(xì)胞傳代是否過于頻繁;傳代平臺期是否過長。
(來源: 英 弗雷謝尼 《動物細(xì)胞培養(yǎng)基本技術(shù)指南》 細(xì)胞生長緩慢 拜力生物編輯整理)