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當前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>科研細胞>>原代細胞>> 大鼠腎小球內(nèi)皮細胞
規(guī)格 | 5×105Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 組織來源 | 腎組織 |
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貨號 | CS-X2923 | 細胞形態(tài) | 內(nèi)皮細胞樣 |
產(chǎn)品信息:
貨號 | CS-X2923 | 組織來源 | 腎組織 |
傳代特性 | 可傳2-3代 | 培養(yǎng)基 | 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 |
細胞形態(tài) | 內(nèi)皮細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
培養(yǎng)條件 | 換液頻率 | 每2-3天換液一次 |
商品介紹:
產(chǎn)品名稱:大鼠腎小球內(nèi)皮細胞 3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 4.細胞簡介: 大鼠腎小球內(nèi)皮細胞分離自腎組織;腎臟是機體的重要器官,它的基本功能是生成尿液,借以清除體內(nèi)代謝產(chǎn)物及某些廢物、毒物,同時經(jīng)重吸收功能保留水份及其他有用物質(zhì),如葡萄糖、蛋白質(zhì)、氨基酸、鈉離子、鉀離子、碳suan氫鈉等,以調(diào)節(jié)水、電解質(zhì)平衡及維護酸堿平衡。腎臟同時還有內(nèi)分泌功能,生成腎素、促紅細胞生成素、活性維sheng素d3、前列腺素、激肽等,又為機體部分內(nèi)分泌激素的降解場所和腎外激素的靶器官。腎臟的這些功能,保證了機體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定,使新陳代謝得以正常進行。腎小球是腎元中的用于將血液過濾生成原尿的一團毛細血叢,被鮑氏囊所包裹,是尿液形成的重要構(gòu)造。血液經(jīng)由入球小動脈進入腎小球。腎小球內(nèi)的微血管不像其他微血管,匯流入靜脈,而是流入出球小動脈。在腎小球內(nèi),微血管受到高壓,而加速了超濾作用(hyperfiltration)的進行。微血管中的血液經(jīng)由超濾作用之后,形成濾液,滲入鮑氏囊內(nèi)。腎小球與鮑氏囊合稱為腎小體,腎小球的過濾速率便稱為腎小球過濾率。腎小球內(nèi)皮細胞是一類特殊微血管類型的細胞。細胞為圓形、多角形,單層貼壁生長;細胞質(zhì)豐富,細胞核為圓形或卵圓形。腎小球內(nèi)皮細胞被覆于腎小球毛細血管壁腔側(cè),與血流直接接觸,是腎小球濾過膜的第一道屏障,可粘附細菌和白細胞,修復基底膜,并有抗凝、抗血栓的作用;所以,體外培養(yǎng)的腎小球內(nèi)皮細胞在免疫學和病理生理學領(lǐng)域中具有重要的研究價值。 5.方法簡介: 公司實驗室分離的大鼠腎小球內(nèi)皮細胞采用先機械研磨過不銹鋼網(wǎng)篩分離得到腎小球、后用膠原酶消化,結(jié)合內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測: 公司實驗室分離的大鼠腎小球內(nèi)皮細胞經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息: 包被條件 PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%) 培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 換液頻率 每2-3天換液一次 生長特性 貼壁 細胞形態(tài) 內(nèi)皮細胞樣 傳代特性 可傳2-3代 消化液 0.25%yi蛋白酶 培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5% |
細胞保存方法:
(一)細胞凍存
1. 配制含10%DMSO或甘油、10~20%小牛血清的凍存培養(yǎng)液;
2. 取對數(shù)生長期的細胞,去除舊培養(yǎng)液,用PBS清洗。
3. 去除PBS,加入適量(覆蓋培養(yǎng)皿表面)把單層生長的細胞消化下來;
4. 離心1000rpm,5min;
5. 去除,加入適量配制好的凍存培養(yǎng)液,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,計數(shù),調(diào)節(jié)凍存液中細胞的最終密度為5×106/ml~1×107/ml;
6. 將細胞分裝入凍存管中,每管1~1.5 ml;
7. 在凍存管上標明細胞的名稱,凍存時間及操作者;
8. 凍存:標準的凍存程序為降溫速率-1~-2℃/ min;當溫度達-25℃以下時,可增至-5℃~-10℃/min;到-100℃時,則可迅速浸入液氮中。也可將裝有細胞的凍存管放入-20℃冰箱2h ,然后放入-70℃冰箱中過夜,取出凍存管,移入液氮容器內(nèi)。
注意事項:
1)、欲冷凍保存之細胞應(yīng)在生長良好且存活率高之狀態(tài),約為80~90%致密度。冷凍前檢測細胞是否仍保有其性質(zhì),應(yīng)在冷凍保存前一至二日測試是否有抗體之產(chǎn)生。
2)、細胞在液氮中可長期凍存無,而不會影響細胞活力;在-70度可保存數(shù)月。
3)、注意冷凍保護劑之品質(zhì)。DMSO應(yīng)為試劑級等級,無菌且無色(以0. 22micron FGLP Telflon過濾或是直接購買無菌產(chǎn)品,如Sigma D-2650),以5~10 ml小體積分裝,4 ℃避光保存,勿作多次解凍。Glycerol亦應(yīng)為試劑級等級,以高壓蒸汽滅菌后避光保存。在開啟后一年內(nèi)使用,因長期儲存后對細胞會有毒性。本方法中先制備雙倍凍存液,可避免DMSO直接加入時釋放的熱量對細胞的損傷。緩慢逐滴加入細胞懸液是使細胞逐步適應(yīng)高滲,可降低細胞受損。DMSO可能引起部分白血病細胞株的分化,可換用10%甘油凍存。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠骨骼肌細胞 | 人抗外切mei體復合物成分RRP45(EXOSC9)抗體檢測試劑盒 |
小鼠牙乳頭細胞 | 人血清/糖皮質(zhì)激su調(diào)節(jié)激mei2(GSK2)檢測試劑盒 |
小鼠胰腺上皮細胞 | 人抗蛋白mei3抗體IgG(PR3 Ab-IgG)試劑盒ELISA |
小鼠脂肪干細胞 | 人6-羥多巴胺(6-OHDA) ELISA檢測試劑盒 |
小鼠子宮成纖維細胞 | 雅氏瓦螨PCR試劑盒 |
豬前脂肪細胞 | 益母草染料法PCR鑒定試劑盒 |
104C1 (轉(zhuǎn)化的豚鼠胎體細胞) | 大腸埃希菌(大腸O)stx(bp)和stx(bp)常規(guī)PCR檢測試劑盒 |
293T [HEK-293T](人胚腎細胞) | 輪狀病毒群PCR檢測試劑盒 |
6T-CEM (人T細胞白血病細胞) | 甲型流感()病毒H5N8亞型RT-PCR試劑盒 |
A2780 (人卵巢癌細胞) | 人腺病毒D86型PCR試劑盒 |
Acc-2 (人涎腺腺樣囊性癌細胞) | 山羊CYTB基因核suan檢測試劑盒 |
B82 (小鼠腫瘤細胞系) | 節(jié)菱孢霉屬通用PCR檢測試劑盒 |
Ana-1 (小鼠巨噬細胞) | 大鼠腎小球內(nèi)皮細胞賈弟蟲PCR檢測試劑盒 |
B-CPAP (人甲狀腺乳頭狀癌細胞) | 沙門氏菌和痢疾桿菌PCR聯(lián)合測定試劑盒 |
BHK-21 [C-13] (倉鼠腎成纖維細胞) | 凋亡抑制蛋白Survivin基因PCR檢測試劑盒 |
操作步驟:
1)、冷凍前24-48小時更換半量或全量培養(yǎng)基,使細胞處于指數(shù)生長期。
2)、配制冷凍保存溶液(使用前配制):另取一離心管,加入培養(yǎng)基、血清,逐滴加入二甲基亞砜 (DMSO)至20%濃度,即制成雙倍的凍存液,置于室溫下待用。
3)、離心收集培養(yǎng)之細胞,用加血清的培養(yǎng)基重懸起細胞,取少量細胞懸浮液(約0. 1 ml)計數(shù)細胞濃度及凍前存活率。
4)、取與細胞懸液等量的凍存液,緩慢逐滴加入細胞懸液,并晃動試管,制成細胞凍存懸液(DMSO后濃度為5~10%),使細胞濃度為1~5×106cells/ ml,混合均勻,分裝于已標示之冷凍保存管中,1~2 ml/vial,并取少量細胞懸浮液作污染檢測。嚴密封口后,注明細胞名稱、代數(shù)、日期。然后進行凍存。
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