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牛孕酮ELISA 檢測試劑盒操作及注意事項

時間:2012/7/11閱讀:424
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牛孕酮ELISA 檢測試劑盒操作及注意事項

操作注意事項:

 

 

試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。

 

實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。

不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。

使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物AB液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。

使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。

底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。

加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。

 

按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

操作步驟:

 

 

 

1. 使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產生加樣上的誤差。

 

2. 根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定,能使用復孔的盡量做復孔。牛孕酮ELISA 檢測試劑盒

3. 加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的*標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育45分鐘。

4. 甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作4次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。

5. 每孔加入100ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。

6. 甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作4次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。

7. 每孔加入底物AB50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育5分鐘。避免光照。

8. 取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結果。

450nm波長處測定各孔的OD值。牛孕酮ELISA 檢測試劑盒

牛孕酮ELISA 檢測試劑盒

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