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懸浮細胞的分離方法

時間:2016/1/8閱讀:343
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    從人或動物體內(或胚胎組織)取出的標本組織是結合緊密的多種細胞,不利于各個細胞在體外培養中生長繁殖;若需獲取大量細胞,必須將現有的組織塊充分散開,使細胞解離成單個細胞。若血液、羊水、胸腔積液或腹水等標本離心分離方法獲取。

(一)材料

1.標本血液、羊水、胸腔積液或腹水等懸液材料。

2.試劑PBS、培養液。

3.器具吸管、離心管、培養瓶。

(二)實驗方法

1.標本材料若是來自血液、羊水、胸腔積液或腹水的懸液材料,zui簡單的方法是采用1000r/min低速離心10min。值得注意的是離心的速度過大,離心時間過長會擠壓細胞造成細胞的損傷甚至死亡。

2·離心的沉淀先用無鈣、鎂PBS洗兩次,再用培養液洗一次后,調整適當細胞濃度后分瓶培養。

3.若選用懸液中某些細胞,經離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層.這樣可根據需要收獲目的細胞。

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