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雙抗體夾心法與競爭法測抗原

時間:2015/9/11閱讀:506
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1. 雙抗體夾心法測抗原

抗體夾心法是檢測抗原zui常用的方法,操作步驟如下:

1)將特異性抗體與固相載體聯結,形成固相抗體。洗滌除去未結合的抗體及雜質。

2)加受檢樣本,保溫反應。樣本中的抗原與固相抗體結合,形成固相抗原抗體復合物。洗滌除去其他未結合物質。

3)加酶標抗體,保溫反應。固相免疫復合物上的抗原與酶標抗體結合。*洗滌未結合的酶標抗體。此時固相載體上帶有的酶量與樣本中受檢抗原的量相關。

4)加底物顯色。

2.競爭法測抗原

小分子抗原或半抗原因缺乏可作夾心法的兩個以上的位點,因此不能用雙抗體夾心法進行測定,可以采用競爭法模式。其原理是標本中的抗原和一定量的酶標抗原競爭與固相抗體結合。標本中抗原量含量愈多,結合在固相上的酶標抗原愈少,zui后的顯色也愈淺。小分子激素、藥物等ELISA測定多用此法。

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