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具有抗原結合部位，能與抗原分子上相應表位發生特異性結合的具有免疫功能的球蛋白。一抗是針對抗原的抗體，二抗是針對一抗的抗體。5. 終止反應：于各反應孔中加入2M硫0.05ml。 6. 結果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結果：反應孔內顏色越深，陽性程度越強，陰性反應為無色或極淺，依據所呈顏色的深淺，以“+"、“-"號表示。也可測O·D值：在ELISA檢測儀上，于450nm(若以ABTS顯色，則410nm)處，以空白對照孔調零后測各孔O·D值，若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍，即為陽性。3) 酶標記抗體工作濃度的選擇：首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定(見酶標記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法"(包被物、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統里準確地滴定其工作濃度。抗原一般是指進入機體內的外來物質，如細菌、病毒、花粉等；抗原也可以是不同物種間的物質，如馬的血清進入兔子的體內，馬血清中的許多蛋白質就成為兔子的抗原物質；二抗：可以和一抗結合，并帶有可以被檢測出的標記(如帶熒光、放射性、化學發光或顯色基團)，作用是檢測一抗。