大鼠血管內皮細胞生長因子C(VEGF-C)ELISA試劑盒
本公司并提供各種屬的血管內皮細胞生長因子C(VEGF-C)ELISA試劑盒
檢測范圍:15ng/L -400 ng/L
保存條件及有效期:
1 2-8℃。
2 6個月
庫存狀態(tài):現(xiàn)貨供應
產品范圍:
人,小鼠,大鼠,豬,兔,其它動物細胞因子;細胞凋亡,活性多肽、自身抗體 ,血栓與止血,
骨代謝,肝纖維化,腫瘤,激素內分泌、自身抗體科研ELISA檢測試劑盒
提供實驗免費代測服務(詳情請!)
可檢測樣本:血液標本,組織液標本,尿液標本,糞便標本,腦脊液標本,胸腹水標本等(具體詳細情況請)
請嚴格參照說明書操作!
注意事項:
1.用前試劑、樣品置室溫平衡不少于10分鐘
2.確定孵育的溫度,應避免溫度的變化。
3.檢查試劑是否被污染。
4.使用封板膜封口,注意每步使用新的封板膜,確定每兩步驟間,酶標板應保持濕潤。
5.吸頭盡可能一次性使用。
6.請嚴格參照說明書操作!
注意事項:
1. 在收集標本前必須有一個完整的計劃,必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。
2. 建議新鮮標本盡早檢測,對收集后及時進行檢測。1-3天左右檢測的樣本可儲存在4℃?zhèn)溆谩H缬刑厥庠蛐枰芷谛允占瘶吮荆垖吮炯皶r分裝后放在-20℃或- 70℃條件下保存,避免反復凍融。
實驗原理:
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠血管內皮生長因子 C(VEGF-C)水平。用純化的血管內皮生長因子 C(VEGF-C)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入血管內皮生長因子 C(VEGF-C),再與 HRP標記的 VEGF-C抗體結合,形成抗體 -抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物 TMB顯色。TMB在 HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的血管內皮生長因子 C(VEGF-C)呈正相關。用酶標儀在 450nm波長下測定吸光度( OD值),通過標準曲線計算樣品中大鼠血管內皮生長因子 C(VEGF-C)濃度。
樣本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應再次離心。
2. 血漿:應根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。
3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心
5. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐3?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
6. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
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