細胞絨毛蛋白/埃茲蛋白（cytovillin/ezrin）ELISA試劑盒

一.試劑盒組成:

二.產品范圍:

人,小鼠,大鼠,豬,兔,其它動物細胞因子;細胞凋亡,活性多肽、自身抗體 ,血栓與止血,

骨代謝,肝纖維化,腫瘤,激素內分泌、自身抗體科研ELISA檢測試劑盒

提供實驗免費代測服務（詳情請!）

三.可檢測樣本：血液標本，組織液標本，尿液標本，糞便標本，腦脊液標本，胸腹水標本等（具體詳細情況請）

四.注意事項：

1．用前試劑、樣品置室溫平衡。

2．確定孵育的溫度，應避免溫度的變化。

3．檢查試劑是否被污染。

4．使用封板膜封口，注意每步使用新的封板膜，確定每兩步驟間，酶標板應保持濕潤。

5．吸頭盡可能一次性使用。

6．請嚴格參照說明書操作！

五.標本的保存：

2-8度下可以保存一周時間，-20度可以保存1個月左右。-80度可以保存1年以上。-196度可以保存10年以上。

注意事項：

1. 在收集標本前都必須有一個完整的計劃，必須清楚要檢測的成份是否足夠穩定。

2.建議新鮮標本盡早檢測，對收集后及時進行檢測。1-3天左右檢測的樣本可儲存在4℃備用。如有特殊原因需要周期性收集標本，請將標本及時分裝后放在-20℃或- 70℃條件下保存，避免反復凍融。

實驗原理：
   本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人細胞絨毛蛋白/埃茲蛋白（CVL）水平。用純化的人細胞絨毛蛋白/埃茲蛋白（CVL）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入細胞絨毛蛋白/埃茲蛋白（CVL），再與HRP標記的羊抗人抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的細胞絨毛蛋白/埃茲蛋白（CVL）呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中人細胞絨毛蛋白/埃茲蛋白（CVL）濃度。
樣本處理及要求：
1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如出現沉淀，應再次離心。
2. 血漿：應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應該再次離心。
3. 尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細胞培養上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
5. 組織標本：切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
6. 標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。