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抗卵巢抗體(AOAb)ELISA試劑盒

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產(chǎn)品型號(hào)YF2256

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廠(chǎng)商性質(zhì)經(jīng)銷(xiāo)商

所在地上海市

更新時(shí)間:2017-08-05 20:29:45瀏覽次數(shù):284次

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抗卵巢抗體(AOAb)ELISA試劑盒
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抗卵巢抗體(AOAb)ELISA試劑盒
規(guī)格:原裝/96T ELISA試劑盒分裝 48T/96T ELISA試劑盒

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實(shí)驗(yàn)原理:以胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白-3(IGFBP-3Elisa試劑盒為例

 

本試劑盒應(yīng)用夾心法測(cè)定標(biāo)本中胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白-3(IGFBP-3水平。用純化的人胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白-3(IGFBP-3受體包被微孔板,往微孔中依次加入IGFBP-3,再與HRP標(biāo)記的羊抗人受體結(jié)合,形成免疫復(fù)合物,經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB顯色TMBHRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白-3呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算樣品中胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白-3(IGFBP-3濃度。

樣本處理及要求:

1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。

2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)去除顆粒。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。

3. 尿液:用無(wú)菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。

4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBSPH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。

5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱(chēng)取重量。加入一定量的PBSPH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8的溫度。加入一定量的PBSPH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。

6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.

7. 不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。

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