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上海恒遠生物科技有限公司


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技術文章

*說明書

閱讀:1398發布時間:2011-2-28

                    *說明書 

                                                             50T

一、原理:
在酸性溶液和還原劑的作用下,使運鐵蛋白中鐵與蛋白分離,使血清中的高鐵還原成亞鐵,后者與雙吡啶結合成粉紅色的絡合物,在一定范圍內,鐵離子的多少與色澤成正比。
二、試劑的組成與配制
1、100mg/L鐵標準貯備液:1ml 溶液一瓶,4℃保存3個月。
   2mg/L鐵標準應用液的配制:取鐵標準貯備液0.2ml加蒸餾水定溶至10ml, 4保存
2、鐵顯色劑:2號甲粉劑一支,2號乙粉劑一支,二號丙液100ml×1瓶,4℃保存6個月。
用時將甲、乙二粉劑倒入丙液中,充分混勻,溶解,即為鐵顯色劑,4℃避光保存。
三、操作表:

 
空白管O
標準管S
測定管U
蒸餾水(ml)
0.5
 
 
2mg/L鐵標準應用液(ml)
 
0.5
 
血清 (ml)
 
 
0.5
鐵顯色劑(ml)
1.5
1.5
1.5

混勻后,沸水浴5分鐘,(空白及標準管可以不煮),冷卻后離心,3500轉/分,離心10分鐘,取上清液1.0ml,0.5cm光徑,波長520nm,雙蒸水調零,測各管吸光度OD值。
四、計算與舉例:
1、 計算公式:
血清鐵(mg/L)=×標準濃度(2mg/L)
血清鐵(umol/L)=×標準濃度(35.81umol/L)
*標準管鐵含量為2000ug/L,鐵原子量為55.847,所以標準管鐵含量為35.81umol/L
2、舉例:
   取血漿0.5ml按操作表進行血清(漿)鐵測定,在520nm處,0.5cm光徑,測定各管吸光度為:空白管0.000,標準管0.038,測定管0.037,則計算如下:
   血清鐵(umol/L)=×標準液濃度=×35.81=34.87(umol/L)

五、注意點:
1、 玻璃器材需嚴格清洗,避免鐵的污染,建議用一次性塑料試管。
2、 若上清渾濁,可再用另一試管再次離心后比色。
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