一、無菌室的使用
1、無菌室應保持清潔整齊，室內僅存放必須的實驗用具如酒精燈、酒精棉、打火機、
鑷子、接種針、接種環、記號筆等。不要放與檢測無關的物品。
2、用75%酒精擦拭工作臺、門、窗、桌、椅及地面，然后用75%酒精噴霧消毒空氣，zui
后臭氧殺菌1小時。
3、定期檢查室內空氣無菌狀況，細菌數應控制在10個以下，發現不符合要求時，應立
即*消毒滅菌。
4、無菌室殺菌前，應將所有物品置于操作之部位（待檢物例外），然后打開紫外燈殺
菌30分鐘，時間一到，關閉紫外燈待用。
5、進入無菌室前，必須于緩沖間更換工作服、工作鞋。
6、操作應嚴格按照無菌操作規定進行，操作中少說話不喧嘩，以保持環境的無菌狀態。
7、火焰滅菌： 接種針、接種環等可直接火焰滅菌。
8、一 般消毒:無菌室內的凳、工作臺、試管架、天平、待檢物容器或包裝均無法進行
滅菌，必須用其他方法進行消毒處理，采用75%酒精擦拭消毒，工作人員的手也用此法
進行消毒。
二、無菌室的準備工作及要求
1、實驗用的有關器材， 搬入無菌室前必須分別進行滅菌消毒。
2、操作人員必須將手清洗消毒，穿戴好白大褂和鞋，才能進入無菌室。
4、進入無菌室后再一次消毒手部，戴上口罩然后才進行實驗操作。
三、無菌室操作過程注意事項
1、玻璃器皿也應輕取輕放，以免破損污染環境。
2、操作應在近火焰區進行，以免染菌。
3、接種環、接種針等金屬器材使用前后均需灼燒，灼燒時先通過內焰，使殘物烘干后再   
灼燒滅菌。
4、使用吸管時，切勿用嘴直接吸、吹吸管，而必須用洗耳球操作。
5、觀察平板時不好開蓋，如欲沾取菌落檢查時，必需靠近火焰區操作，平皿蓋也不能大
開，而是上下蓋適當開縫。
6、工作結束，收拾好工作臺上的樣品及器材，不要的廢品帶出無菌室，zui后用消毒液擦
拭工作臺。
四、無菌室管理規定
1、無菌室地面、臺面、其它表面每3日擦拭1次。操作臺每日用75%酒精擦拭消毒，每
次使用前準備好物品紫外滅菌30分鐘后方可使用。
2、從室外帶入無菌室內的所有物品表面要用75%酒精或紫外照射預先消毒。無菌操作前
75%酒精消毒手掌、手背。整個操作嚴格執行無菌操作。
3、無菌室內定期消毒滅菌：無菌室內地面拖干凈并噴霧消毒。每三天一次。
4、無菌室內無菌狀況定期檢測：滅菌后的接種室內桌上和桌下各放一套培養基平皿，
暴露15分鐘，蓋上，37℃培養24小時，每個平皿的菌落≤4，則認為效果良好，否則
需延長照射時間或加強其它措施。半個月一次。
5、滅菌后物品放在位置，注明滅菌日期，高壓滅菌物品可存放7-14天，過期不能
再用，需重新包裝滅菌。
五、無菌室菌種管理規定
1、車間用的菌種按編碼嚴格劃分做好標識區別擺放，與技術部的實驗菌種分冰箱擺放。
2、車間用菌種每日傳代一次，并做好傳代記錄。
2、車間用的菌種一個月活化一次，嚴格做好標識。
3、車間用菌種每種菌種一年做兩次甘油管冷凍保藏。
4、車間菌種每半年做一次菌種篩選，保持菌種的純正。
六、無菌室外來人員管理規定
1、外來人員進入無菌室必須申請，得到公司領導批準方可進入，進入后必須有專人陪
同，并填寫出入記錄。
2、除本部門以外人員必須穿戴好白大褂、更換鞋，才能進入無菌室。
3、無菌室內無人做實驗，必須保持門鎖閉，其他人進入必須與無菌室保管人員申請。
4、除本部門以外人員在無菌室操作，必須嚴格執行無菌室各項管理制度，否則接受成
長贊助每項5元。
七、無菌室蒸汽滅菌鍋安全使用
1、注意用電安全，鍋內水位要在標準水位以上方可通電使用。
2、鍋內帶滅菌物品不得超過滅菌鍋容積的2/3。
3、滅菌過程中工作人員不得長時間離開，如果因工作需要室內有班組其他工作人員，要予以提醒，并做好看護，以防燙傷。
4、滅菌完畢后要緩慢放氣，必須在壓力表的指針回到“0”以后，放氣閥*打開，待
鍋內蒸氣放盡后，方可開蓋。
5、滅菌鍋的壓力表按時送檢。