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人尿微量白蛋白（mALB）ELISA Kit

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更新時間：2017-02-17 12:29:58瀏覽次數：191次

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產品簡介

人尿微量白蛋白（mALB）ELISA Kit
Human microalbunminuria（mALB）ELISA Kit
檢測范圍：
10μg/L -220μg/L
試劑盒保存：2-8℃。
有效期：6 個月

詳細介紹

人尿微量白蛋白(mALB)ELISA Kit
Human microalbunminuria(mALB)ELISA Kit
實驗原理：
本試劑盒用于測定人尿液相關液體樣本尿微量白蛋白(mALB）含量。應用雙抗體夾心法測定標本中人尿微量蛋白(mALB)水平。用純化的人尿微量蛋白(mALB)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入尿微量蛋白(mALB)，再與 HRP 標記的 mALB 抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過*洗滌后加底物 TMB 顯色。TMB 在 HRP 酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的尿微量蛋白(mALB)呈正相關。用酶標儀在 450nm 波長下測定吸光度（OD 值），通過標準曲線計算樣品中人尿微量蛋白(mALB)濃度。
人尿微量白蛋白(mALB)ELISA Kit操作步驟：
1. 標準品的稀釋與加樣：在酶標包被板上設標準品孔 10 孔，在*、第二孔中分別加標
準品 100μl，然后在*、第二孔中加標準品稀釋液 50μl，混勻；然后從*孔、第二
孔中各取 100μl 分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液 50μl，
混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取 50μl 棄掉，再各取 50μl 分別加到第五、第六孔
中，再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液 50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各
2
取 50μl 分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液 50μl，混
勻后從第七、第八孔中分別取 50μl 加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標準
品稀釋液 50μl，混勻后從第九第十孔中各取 50μl 棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為 50μl，
濃度分別為 180μg/L，120μg/L ，60μg/L，30μg/L，15μg/L）。
2. 加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、待測樣
品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40μl，然后再加待測樣品 10μl（樣
品zui終稀釋度為 5 倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混
勻。
3. 溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4. 配液：將 30（48T 的 20 倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30（48T 的 20 倍）倍稀釋后備用。
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后棄去，如此
重復 5 次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標試劑 50μl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同 3。
8. 洗滌：操作同 5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑 A50μl，再加入顯色劑 B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色
15 分鐘.
10. 終止：每孔加終止液 50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。
11. 測定：以空白空調零，450nm 波長依序測量各孔的吸光度（OD 值）。測定應在加終止
液后 15 分鐘以內進行。
注：人尿微量白蛋白(mALB)ELISA Kit僅供科學研究使用，內容供參考，具體產品信息請在線或。
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Shanghai HuaYi Bio-technology Co.,Ltd