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試劑盒檢測中血清采集及保存
血清采集及保存:全血標本請于室溫放置2小時或 4℃過夜后于1000 x g 離心 20分鐘,取上清即可檢測,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
血漿采集及保存:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標本采集后 30分鐘內于2 - 8° C 1000 x g 離心 15分鐘,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本采集及保存:請 1000 x g 離心20分鐘,取上清即可檢測,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
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注:標本置4℃保存應小于 1周, -20℃或-80℃均應密封保存, -20℃不應超過 1個月, -80℃不應超過 2個月;標本溶血會影響zui后檢測結果,因此溶血標本不宜進行此項檢測。
實驗開始注意事項:各試劑均應平衡至室溫(試劑不能直接在 37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量,如樣品濃度過高時,應對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數。 (參照說明書)
加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液 100μl,余孔分別加標準品或待測樣品 100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液 A工作液 100μl(在使用前一小時內配制) ,酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板 3次,每次浸泡 1-2分鐘,大約 400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干) 。 (參照說明書)
試劑準備:所有試劑都必須在使用前達到室溫,使用后請立即按照說明書要求保存試劑.實驗操作中請使用一次性的吸頭,避免交叉污染。
加樣:加樣或加試劑時,請注意在吸取標本/標準品,酶結合物或底物時,*個孔與zui后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大,將會導致不同的“預孵”時間,從而明顯地影響到測量值的準確性及重復性。一次加樣時間(包括標準品及所有樣品)控制在 10分鐘內,如標本數量多,推薦使用多道移液器加樣。 (參照說明書)
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