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中級(jí)會(huì)員 | 第16年

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小鼠ELISA試劑盒在試驗(yàn)中常見問題的詳解

時(shí)間:2021/9/7閱讀:1657
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質(zhì)控血清的運(yùn)用

小鼠ELISA試劑盒在試驗(yàn)中常見問題的詳解,可以在-20℃堅(jiān)持半年定值不變。冰凍狀態(tài)融化運(yùn)用時(shí),應(yīng)先混勻,未用完部分可在4℃保存5天。不宜重復(fù)冰融或自行分裝。開展某項(xiàng)查驗(yàn)的室內(nèi)質(zhì)控工作需要的質(zhì)控血清,一般按3-6個(gè)月用量預(yù)備。克己的不定值質(zhì)控血清,在一批質(zhì)控血清將用完之前,需預(yù)備下一批質(zhì)控血清。質(zhì)控血清要求性能安穩(wěn),較長期內(nèi)效價(jià)不變,其理化性質(zhì)應(yīng)與病人樣本附近,這樣才干有效地起到監(jiān)測(cè)作用。

637665372535047090387.png質(zhì)控血清的制備

每個(gè)試驗(yàn)室可以依據(jù)自己的條件,選用臨床中心供給的質(zhì)控血清,或按以下方法自己制備本室運(yùn)用的質(zhì)控血清(以乙肝質(zhì)控血清為例)。

1) 搜集新鮮的無溶血、無黃疸、無細(xì)菌污染的陽性血清。

2) 56℃加熱10小時(shí)來活。

3) 離心或過濾除去沉積。

4) 用10%的小牛血清或正常人血清(PBS緩沖液)將搜集的血清稀釋至所需的濃度。如能用正常的人血清稀釋更好,因其成份更接近于檢測(cè)標(biāo)本。

5) 抽濾除菌。按一次運(yùn)用的量分裝小安瓿,封口,20℃保存?zhèn)溆谩2豢芍貜?fù)凍融。

被檢物要求檢出的水平常被認(rèn)為是質(zhì)控血清應(yīng)選擇的水平。假如該試驗(yàn)還有其它要求,則應(yīng)加所要求濃度的質(zhì)控物。

6) 標(biāo)定含量。20-30次測(cè)定成果刪去>±2SD數(shù)據(jù)的均值作為靶值,并與已知定值血清比照測(cè)定。

臨界值質(zhì)控血清

質(zhì)控制血清分定值和未定值兩種。小鼠ELISA試劑盒如只用一份質(zhì)控血清定值,一般定在正常值與異常值接壤點(diǎn)上,定性測(cè)守時(shí)處于弱陽性水平,稱為臨界值。乙肝標(biāo)志物臨界值的制定,應(yīng)按臨床要求,為供給統(tǒng)一的判斷弱陽性的規(guī)范。

臨界值質(zhì)控血清可以作為試劑盒中的陽性對(duì)照品和陰性對(duì)照品以外的第三個(gè)對(duì)照品,它可以靈敏地反映出試劑盒的檢出水平,確保弱陽性反應(yīng)的標(biāo)本不漏檢。

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