先用肉湯培養(yǎng)基復活，此為菌種*代；從營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)物中挑菌液劃相應的選擇性培養(yǎng)基平板，選擇典型菌落，接種于營養(yǎng)瓊脂斜面，此為菌種第二代；一個月后，從斜面上挑菌劃相應的選擇性培養(yǎng)基平板，選擇典型菌落，接種于營養(yǎng)瓊脂斜面，此為菌種第三代；依次下去，直至第五代，就可以不再接了，可以買新的菌種了。

1.選擇復活用的培養(yǎng)基,可選用說明書中推薦的培養(yǎng)基,根據(jù)菌株的分類進行選擇,請說明購買菌株的類型或名稱；

2.選擇菌株保存的方法：冷凍真空干燥保藏法（可保存10年以上，需真空冷凍干燥機等設備）、超低溫保藏（可保存兩年左右，但需有-80℃冰箱）、定期移植保藏法（可保存1-6月） ，請根據(jù)實際情況進行選擇；

3.準備需要的培養(yǎng)基、保存管、甘油、尖頭吸管（有時常規(guī)吸管太粗，無法深入菌種管底部）、開啟工具等；

4.無菌開啟菌種管，將管內(nèi)干粉溶解轉(zhuǎn)入相關培養(yǎng)基，培養(yǎng)后選擇保存菌種的代數(shù)；

5.進行驗證實驗（革蘭氏染色、菌落形態(tài)、生化試驗、血清試驗或其他鑒定系統(tǒng)等），確認后保存菌種，注意整個過程的無菌操作。