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技術文章

動物組織樣本的前處理

閱讀:181發(fā)布時間:2015-8-12

一、勻漿介質(zhì)的制備:

一般采用pH 7.40.01mol/L Tris-HCl1mmol/L EDTA-2Na0.01mol/L蔗糖,0.8%氯化鈉溶液或直接用0.86%的生理鹽水作為勻漿介質(zhì)。

二、組織勻漿的制備

1、取組織塊(0.1g~0.2g)zui少可到25mg在冰冷的生理鹽水中漂洗,除去血液,濾紙拭干,準確稱重,放入5ml的勻漿管中。

2、按重量(g):體積(ml)=1:9的比例加入9倍體積的勻漿介質(zhì)(pH7.4, 0.01mol/L Tris-HCl,1mmol/L EDTA-2Na ,0.01mol/L蔗糖,0.8%的氯化鈉溶液)或者0.86%的生理鹽水于勻漿管中,冰水浴條件下,用眼科小剪盡快剪碎組織塊。

3、勻漿的方式有多種:手工勻漿,機器勻漿,超聲粉碎。

① 手工勻漿:左手持勻漿管將下端插入盛有冰水混合物的器皿中,右手將搗桿垂直插入套管中,上下轉動研磨數(shù)十次(6~8分鐘),充分研碎,制成10%的勻漿液。

② 機器勻漿:用組織搗碎機10000~15000 轉/分 上下研磨制成10%組織勻漿,也可用內(nèi)切式組織勻漿機制備(勻漿時間10秒/次,間隙30秒,連續(xù)3~5次,在冰水中進行),皮膚、肌肉組織等可延長勻漿時間。

③ 超聲粉碎:用超聲粉碎機進行粉碎,可用Soniprep150型超聲波發(fā)生器以振幅14微米超聲處理30秒使細胞破碎,也可用國產(chǎn)超聲波發(fā)生儀,用400安培,5秒/次,間隙10秒反復3~5次。

        鏡檢觀察:取少量組織勻漿作涂片(直接涂片、染色均可以),顯微鏡下觀察細胞是否破碎,若沒有則可延長勻漿時間。

4、將制備好的10%勻漿液用普通離心機或低溫低速離心機2500轉/分左右,離心10~15分鐘,取上清液進行測定.

、樣本保存:

        動物組織樣本暫時不測定,可立即低溫凍存,溫度越低越好,中間如*凍融,-20℃以下可保存三個月,-70℃以下可保存六個月。

        制備好的勻漿液建議不要凍存,當天進行測定,如放置時間過長相關酶活會有所下降,部分指標4℃可存放3~5天(如SOD要存放2~3天,MDA可存放3~5,總蛋白測定可存5~7天等)



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產(chǎn)品:

大鼠嗜酸粒細胞趨化蛋白Eotaxin1(Eotaxin1/CCL11)ELISA試劑盒Rat Eotaxin 1 ELISA試劑盒 
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大鼠TNF-alpha ELISA試劑盒Rat TNF-alpha ELISA Kit
大鼠血管生成素4(ANG-4)ELISA試劑盒Rat Angiopoietin 4,ANG-4 ELISA試劑盒
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大鼠*受體(TR)ELISA試劑盒Rat thrombin receptor,TR ELISA試劑盒
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大鼠白介素4(IL-4)ELISA試劑盒Rat Interleukin 4,IL-4 ELISA試劑盒 
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大鼠結合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)ELISA試劑盒Rat Haptoglobin,Hpt/HP ELISA試劑盒
大鼠*(VE)ELISA試劑盒Rat Vitamin E,VE ELISA試劑盒
大鼠堿性成纖維細胞生長因子6(bFGF-6)ELISA試劑盒Rat basic fibroblast growth factor 6,bFGF-6 ELISA試劑盒 
大鼠抑制素B(INH-B)ELISA試劑盒Rat inhibin B,INH-B ELISA試劑盒
大鼠白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)ELISA試劑盒Rat Interleukin 1 receptor antagonist, IL-1ra ELISA試劑盒
大鼠正常T細胞表達和分泌因子(RANTES/CCL5)ELISA試劑盒Rat regulated on activation in normal T-cell expressed and secreted,RANTES ELISA試劑盒 
大鼠糖皮質(zhì)激素受體α(GR-α)ELISA試劑盒Rat glucocorticoid receptor-α,GR-α ELISA試劑盒 
大鼠轉化生長因子β2(TGFβ2)ELISA試劑盒Rat transforming growth factorsβ2,TGFβ2 ELISA試劑盒 
大鼠單核細胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA試劑盒Rat monocyte chemotactic protein 4,MCP-4 ELISA試劑盒 
大鼠硝基*(NT)ELISA試劑盒Rats, nitrotyrosine (NT) ELISA Kit
大鼠前列腺素F(PGF)ELISA試劑盒rat Prostaglandin F,PG-F ELISA試劑盒
大鼠膠原酶I(CollagenaseI)ELISA試劑盒Rat Collagenase I ELISA試劑盒
大鼠磷脂酶A2(PL-A2)ELISA試劑盒Rat Phospholipidase A2,PL-A2 ELISA試劑盒
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大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶10(MMP-10)ELISA試劑盒Rat matrix metalloproteinase 10,MMP-10 ELISA試劑盒 
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大鼠*腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)ELISA試劑盒Rat nicotinamide adenine dinucleotide phosphate,NADPH ELISA試劑盒 
大鼠牛小腸堿性磷酸酶(CIAP)ELISA試劑盒Rat Calf Intestine Alkaline Phosphatase,CIAP ELISA試劑盒
大鼠水通道蛋白2(AQP-2)ELISA試劑盒Rat Aquaporin 2,AQP-2 ELISA試劑盒
大鼠腎上腺髓質(zhì)素(ADM)ELISA試劑盒Rat adrenomedullin,ADM ELISA試劑盒
大鼠中性粒細胞彈性蛋白酶(NE)ELISA試劑盒Rat neutrophil elastase,NE ELISA試劑盒
大鼠二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)ELISA試劑盒Rat dipeptidyl peptldase Ⅳ,DPPⅣ ELISA試劑盒
大鼠蛋白磷酸酶(PP)ELISA試劑盒Rat Protein Phosphatase,PP ELISA試劑盒
大鼠性激素結合球蛋白(SHBG)ELISA試劑盒Rat sex hormone-binding globulin,SHBG ELISA試劑盒
大鼠*(Cortisol)ELISA試劑盒Rat Cortisol ELISA試劑盒
大鼠催乳素(PRL)ELISA試劑盒rat prolactin,PRL ELISA試劑盒
大鼠甲狀腺素抗體(TAb)ELISA試劑盒Rat Thyroxine antibody,TAb ELISA試劑盒
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大鼠α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA試劑盒Rat α1-Acid glycoprotein,α1-AGP ELISA試劑盒
大鼠血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA試劑盒Rat angiotension Ⅱ,ANG-Ⅱ ELISA試劑盒
大鼠白介素1β (IL-1β)ELISA試劑盒Rat interleukin 1 β (IL-1 β) ELISA Kit
大鼠巨噬細胞來源的趨化因子(MDC/CCL22)ELISA試劑盒Rat Macrophage-Derived Chemokine,MDC ELISA試劑盒 
大鼠轉鐵蛋白受體(TFR/CD71)ELISA試劑盒Rat transferrin receptor,TFR ELISA試劑盒
大鼠胰島素(INS)ELISA試劑盒Rat Insulin,INS ELISA試劑盒
大鼠透明質(zhì)酸結合蛋白(HABP)ELISA試劑盒Rat Hya]uronate binding protein,HABP ELISA試劑盒
大鼠胰島素樣生長因子2(IGF-2)ELISA試劑盒Rat Insulin-like growth factor 2,IGF-2 ELISA試劑盒 
大鼠轉化生長因子α(TGF-α)ELISA試劑盒Rat transforming growth factor α,TGF-α ELISA試劑盒
大鼠白介素1α(IL-1α)ELISA試劑盒Rat Interleukin 1α ,IL-1α ELISA試劑盒 
大鼠紅細胞生成素(EPO)ELISA試劑盒Rat Erythropoietin,EPO ELISA試劑盒 
大鼠纖溶抑制因子/*激活的纖溶抑制物(TAFI)ELISA試劑盒Rat Thrombin activatable fibrinolysis inhibitor,TAFI ELISA試劑盒
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大鼠26S蛋白酶體(26SPSM)ELISA試劑盒Rat 26S proteasome,26S PSM ELISA試劑盒
大鼠多巴胺(DA)ELISA試劑盒Rat dopamine,DA ELISA試劑盒
大鼠維甲類X受體α(RXRα)ELISA試劑盒Rat retinoid X receptor alpha (RXR alpha) ELISA Kit
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大鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)ELISA試劑盒Rat Endothelial nitric oxide synthase 3,eNOS-3 ELISA試劑盒
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大鼠內(nèi)分泌腺來源的血管內(nèi)皮生長因子(EG-VEGF)ELISA試劑盒Rat Endocrine gland vascular endothelial growth factor,EG-VEGF ELISA試劑盒 
大鼠β羥丁酸(βOHB)ELISA試劑盒Rat Beta-Hydroxybutyric Acid,β-OHB ELISA試劑盒 
大鼠白介素16(IL-16)ELISA試劑盒Rat Interleukin 16,IL-16 ELISA試劑盒 
大鼠TNF-alphaELISA試劑盒Rat TNF-alpha ELISA 試劑盒
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