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上海酶聯生物研究所
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閱讀：336發布時間：2012-7-11
日前，雜志《病毒學雜志》（Journal of Virology）在線發表了*上海巴斯德研究所周保羅研究組關于艾滋病病毒I型（HIV-1）疫苗的成果：一種基于果蠅S2細胞的新型HIV-1 病毒樣顆粒（VLP）表達系統。這是世界上報道采用果蠅S2細胞表達系統制備HIV-1 VLP作為艾滋病疫苗組分。
2009年在泰國完成的RV144 HIV疫苗實驗雖然獲得了31.2%的保護率，但是仍然不能用于人群接種，該疫苗采用痘病毒載體初免，GP120蛋白加強。一個成功的HIV-1疫苗應既能夠誘導出HIV-1胞膜蛋白特異性的廣譜中和抗體，又能夠誘導出多種蛋白特異性的T細胞免疫反應。在眾多的HIV-1免疫原設計中，VLP由于能夠將天然構象的胞膜蛋白刺突展示于其表面，并且能夠同時誘導體液和細胞免疫反應而被認為優于GP120蛋白。但是，目前的HIV-1 VLP表達系統在某些方面還存在缺陷。
為了克服這些缺陷，博士研究生楊立飛、宋宇峰等在周保羅研究員的指導下，開發出一種基于果蠅S2細胞的新型HIV-1 VLP表達系統。首先，他們構建了表達HIV-1 VLP的S2細胞穩轉克?。蝗缓笱芯苛嗽撓到y表達的VLP胞膜蛋白的表達、剪切、組裝以及糖基化等理化特征，并且采用冷凍電鏡（Croy-EM）和冷凍電子斷層成像（Croy Electron Tomography）對VLP的形態學及其表面刺突的數量進行了仔細分析；zui后研究了VLP的抗原性和免疫原性。
研究表明，采用這一新型VLP表達系統制備的HIV-1 VLP其表面膜蛋白能夠正確剪切、糖基化并且和gag蛋白一起組裝成病毒樣顆粒；采用該系統制備的HIV-1 VLP產量與桿狀病毒表達系統的產量相當，甚至更高。Cryo-EM和Tomography研究發現，純化后的VLP表面平均包含17個膜蛋白刺突，并且保留了多個已知的廣譜中和抗體表位。研究人員采用DNA初免-VLP加強，并伴以CpG佐劑的接種策略，可以在小鼠體內誘導出胞膜蛋白特異性的抗體反應：包括ELISA結合抗體、中和抗體、ADCC和ADCVI特異性抗體反應，以及胞膜蛋白和gag特異性的CD8 T細胞免疫反應等，具有更好的免疫保護效果。綜上所述，這一新型VLP表達系統制備的HIV-1 VLP具有很多優良的特性，可以開發成為HIV-1疫苗的有效組分。
該研究是與中科院生物物理研究所朱平研究組合作完成的，得到了國家科技重大專項的資助。
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