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上海酶聯生物研究所
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閱讀：607發布時間：2010-06-24
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常見的免疫檢測五大技術
（一）免疫酶染色試驗 （immunoenzyme staining test，IEST） 免疫酶染色試驗以含寄生蟲病原的組織切片、印片或培養物涂片為固相抗原，當其與待測標本中的特異性抗體結合后，可再與酶標記的第二抗體反應形成酶標記免疫復合物，后者可與酶的相應底物作用而出現肉眼或光鏡下可見的呈色反應。
（二）皮內試驗 （intrader rpmal test,ID） 宿主在病原體刺激后，體內產生親細胞性抗體（IgE和IgG4）。當其與相應抗原結合后，肥大細胞和嗜堿性粒細胞脫顆粒，釋放生物活性物質，引起注射抗原的局部皮膚出現皮丘及紅暈，以此便可判斷體內是否某有種特異性抗體存在。
（三）免疫擴散（immunodiffusion）和免疫電泳（immunoelectrophoresis）
1．免疫擴散 于一定條件下，抗原與抗體在瓊脂凝膠中相遇，在二者含量比例合適時形成肉眼可見的白色沉淀。本法有兩種類型：①單相免疫擴散：將一定量的抗體混入瓊脂凝膠中，使抗原溶液在凝膠中擴散而形成沉淀環，其大小與抗原量成正比；②雙相免疫擴散：將抗原與抗體分別置于凝膠板的相對位置，二者可自由擴散并在中間形成沉淀線。用雙相免疫擴散法既可用已知抗原檢測未知抗體，也可用已知抗體檢測未知抗原。
2．免疫電泳 是將免疫擴散與蛋白質凝膠電泳相結合的一項技術。事先將抗原在凝膠板中電泳，之后在凝膠槽中加入相應抗體，抗原和抗體雙相擴散后，在比例合適的位置，產生肉眼可見的弧形沉淀線。
（四）酶聯免疫吸附試驗 （enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）
vvv 酶聯免疫吸附試驗原理是將抗原或抗體與底物（酶）結合，使其保持免疫反應和酶的活性。把標記的抗原或抗體與包被于固相載體上的配體結合，再使之與相應的無色底物作用而顯示顏色，根據顯色深淺程度目測或用酶標儀測定OD值判定結果。
（五）對流免疫電流試驗 （counter-immunoelectrophoresis，CIE） 對流免疫電泳試驗是以瓊脂或瓊脂糖凝膠為基質的一種快速，敏感的電泳技術。既可用已知抗原檢測抗體，又可用已知抗體檢測抗原。反應結果可信度高，適用范圍廣。以本法為基礎改進的技術有酶標記抗原對流免疫電泳（enzyme-linked antigen counterimmunoelectrophoresis,ELACIE ）和放射對流免疫電泳自顯影（radio-immuno-counterelectrophoretic autography，RCIEPA）等技術。二者克服了電泳技術本身不夠靈敏的弱點。
（六）間接紅細胞凝集試驗（indirect haemagglutination test，IHA） 以紅細胞作為可溶性抗原的載體并使之致敏。致敏的紅細胞與特異性抗體結合而產生凝集，抗原與抗體間的特異性反應即由此而顯現。常用的紅細胞為綿羊或O型人紅細胞。
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