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上海酶聯(lián)生物研究所
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閱讀：934發(fā)布時間：2010-06-04
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*試劑的配制方法
基于技術水平原因，所使用的*絕大部分是國外產品，試劑也絕大部分為*試劑。每測定一份標本，儀器所使用的稀釋劑zui少要在20ml以上，另加幾毫升的溶血劑、清潔劑、再加上10%-20%各種耗損，這樣消耗在試劑上的資金就相對很大。另外在試劑訂購、運輸、搬運、儲存方面都給使用單位帶來不小的麻煩。因此我科專門對*的試劑進行研制，經臨床運用獲得滿意效果。
1 材料和方法
1.1 材料*、分光光度計、滲透壓儀、pH測量儀、*、色譜儀等。分析儀原裝試劑：稀釋液、溶血劑、清潔劑。過濾盤、NaCL、KCL、Na2HPO4、NaH2PO4、NaHCO3、Na2CO3、草酸銨、NaN3、表面活性劑等等。
1.2 方法 *的測定原理大多為電阻法，因此其所用細胞稀釋試劑應為導電性良好的電解質液體。同時也要考慮細胞的收縮與擴大問題，為了不使細胞擴大到破裂，液體應為等滲或高滲溶液。溶血劑要考慮用什么表面活性劑成分來溶解紅細胞，并使對環(huán)境污染zui小，且能有效保護白細胞。清潔劑要考慮用那一種清潔劑清洗*管道，且腐蝕管道可能zui小。查閱、累積儀器測定RBC,WBC,PLT的各種試劑配方，并歸類，這樣容易找出3種試劑的各自關系和內在。運用你能找到的分析儀器和檢測手段，測定你單位的*原裝試劑成分。稀釋液：K+,Na+,Cl-,Ca2+,Mg2+,P,HCO3-等的含量，PH值，滲透壓等。溶血劑：K+,Na+,Cl-,Ca2+,Mg2+,P,HCO3-,Br,NH3,SO32-等的含量，PH值,滲透壓,測定出溶血劑溶解紅細胞的Hb光譜吸收曲線。清潔劑：K+,Na+,Cl-,Ca2+,Mg2+,P,HCO3-,Br,NH3,SO32-等的含量，PH值,滲透壓等.
1.2.1 試劑配制根據(jù)上面步驟的分析,和累積的試劑配方資料,推算出稀釋液的主要的緩沖體系和濃度并配給適當?shù)碾娊赓|成分,使配出的試劑在PH,滲透壓、導電性等方面與原裝稀釋液非常相近，而后調入適當?shù)姆栏瘎?。對于溶血劑要判斷出表面活性劑的種類（可通過色譜儀或溶解紅細胞的Hb吸收曲線幫助判斷）,并通過試驗獲得表面活性劑的濃度.清潔劑用配制好的稀釋液加入適量的相關表面活性劑或成品洗滌劑構成,要考慮對分析儀管道和感應器的腐蝕情況.在以上基礎上,根據(jù)滲透壓、PH值和電解質逐漸調整配方,使之與原裝試劑相仿,zui后定下配方,按方配制.
1.2.2 試劑過濾所配試劑的用途為血細胞分析,過濾設備應比較精細,試劑中的粒子直徑應小于0.5um這樣才能測定血小板,以達到測定血小板的準確性.
1.2.3 試劑分裝根據(jù)需要B將各種試劑按不同的容量分裝,以便使用和運輸.
2 結果 按以上方法和步驟配制出的試劑B能夠保證與分析儀測定參數(shù)相匹配,保證細胞脈沖結果一致性和穩(wěn)定性,使自配試劑在Hb吸收光譜、WBC對比分類對照、相關性方面均有滿意結果，參見文獻。自配*試劑在成分、基本理化指標與該儀器原配試劑基本一致狀況下，自配試劑可替代進口*試劑運用于進口*。
3 討論 根據(jù)血細胞分析測定原理,配制出的稀釋液、溶血劑、清潔劑在導電性能、滲透壓、PH等理化性質方面都與*試劑相仿,且無損壞*管道系統(tǒng),感應系統(tǒng)的化學成分,就不會對*造成損壞;再則現(xiàn)在試劑供應商提供的試劑，也不能保證全都是*試劑，自我配制的試劑，已出現(xiàn)在供銷市場，在這種情況下應當自己給自己一個機會，運用自己的知識，發(fā)揮自己的才干，找出*幾種試劑的內在，從簡單的稀釋液入手，逐漸找到配制試劑的方法和信心，再順序進入溶血劑的配制，清潔劑的調配，找出合適的防腐劑。在解決一個一個的問題后，會出現(xiàn)創(chuàng)造和開發(fā)的快感，同時也為你所在的集體，解決了試劑訂購、運輸、搬運、儲存方面的困難。又節(jié)約了大量的資金,并且配制的試劑,在分析儀上使用,無需調整儀器測定狀態(tài)而直接運用.
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