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上海酶聯(lián)生物研究所

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細(xì)胞消化*的配制

閱讀：757發(fā)布時間：2012-1-9

對一般細(xì)胞 0.25% *（*，Trypsin）
配方：100ml PBS,0.25g*
步驟：1先配100mlPBS（1000mlPBS:8.0gNaCl,3.4785gPO4HNa2·12H2O
/2.9gPO4HNa2 ,0.2gKCl,0.2gPO4H2K溶于1000ml蒸餾水）
2 稱*0.25g
3 加入PBS中，低速攪拌 <4h冰浴中,或者4℃過夜
低速攪拌0.5h冰浴中
4 調(diào)PH7.4
5 仍在冰浴中
6 過濾，分裝，-20℃保存，4℃短期內(nèi)用完
tip:低速很重要，機械攪拌對酶是一種沖擊，如果起沫，
酶就變性了。低溫，防止酶失活
對難消化的細(xì)胞：在上述配方中，加入0.02g的EDTA（0.02%）
tip:因為EDTA可以絡(luò)合Ca2+，增加消化效力

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