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南京科捷分析儀器有限公司
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閱讀:36發布時間:2022-9-21
一、洗脫溶劑固定洗脫(一種或幾種固定溶劑組成的洗脫液,有人稱之為等度洗脫)
一般是采用一種或幾種固定混合的溶劑作流動相,對色譜柱進行洗脫,其優點是操作簡單、使用成本低(只需要一個高壓泵)。其缺點是分析時間長、分析速度慢、分析效率差。目前的很多分析工作大多數采用梯度洗脫。
二、梯度洗脫
根據色譜分離理論,決定組分保留值的因素是分配系數和分配比;而分配比又叫做容量因子,它表征組分在固定相和流動相中分配量的比。梯度洗脫是用一種或多種不同極性的溶劑作為流動相,在洗脫過程中不斷改變流動相組分的比例,以此調節流動相的極性,使國產液相色譜儀色譜柱流出物(樣品)中的所有組分都有合適的分配比或容量因子,以保證能夠在zui短的時間內,達到分離的目的。梯度洗脫可以提高柱效,加快分析速度,縮短分析時間,并且可以改善液相色譜系統中檢測器的檢測限,提高靈敏度。
梯度洗脫的優點:分離效率高、分析速度快;往往等度洗脫不能解決問題時,采用梯度洗脫就迎刃而解了。所以,梯度洗脫發展很快,使用非常廣泛。
國產液相色譜儀在進行梯度洗脫時,由于多種溶劑混合,而且組成不斷變化,因此帶來一些特殊問題,必須充分重視:
1.要注意溶劑的互溶性,不相混溶的溶劑不能用作梯度洗脫的流動相,有些溶劑在一定比例內混溶,超出范圍就不互溶,使用時更要引起注意。當有機溶劑和緩沖液混合時,還可能析出鹽的晶體,尤其使用磷酸鹽時需特別小心。
2.梯度洗脫所用的溶劑純度要求更高,以保證良好的重現性。進行樣品分析前必須進行空白梯度洗脫,以辨認溶劑雜質峰,因為弱溶劑中的雜質富集在色譜柱頭后會被強溶劑洗脫下來。用于梯度洗脫的溶劑需*脫氣,以防止混合時產生氣泡。
3.每次梯度洗脫之后必須對色譜柱進行再生處理,使其恢復到初始流動相流經色譜柱,使固定相與初始流動相達到*平衡。
4.混合溶劑的粘度常隨組成而變化,因而在梯度洗脫時常出現壓力的變化。例如甲醇和水粘主度都較小,當二者以相近比例混合時粘度增大很多,此時的柱壓大約是甲醇或水流動相時的兩倍。因此要注意防止梯度洗脫過程中壓力超過或色譜柱能承受的zui大壓力。
以上是國產液相色譜儀的兩種洗脫方式,更多信息咨詢南京科捷。
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