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培養(yǎng)基pH的測定和調(diào)整

所有微牛物都受到其生存環(huán)境中PH的影響e通常，選擇性物質(zhì)的存在會縮小它們 生長的PH范圍。有時，培養(yǎng)基的酸度或堿度也能作為一種生長選擇因子。而對于生化 測試培養(yǎng)基，微生物在基質(zhì)中顯tk活性的pH的范圍比生長所耑的PH范圍窄：因此，將培養(yǎng)基的PH調(diào)至預(yù)斯的范圍內(nèi)是很蓽要的。當(dāng)實驗室根據(jù)培養(yǎng)基成分自己配制培養(yǎng)基 時，必須檢測并調(diào)整pH。必須指出的是，即使是生產(chǎn)廠商提供的現(xiàn)成的合成脫水培養(yǎng)基 （尤其是對些庫存的脫水培養(yǎng)基），在制成實驗用培養(yǎng)基后也需要對其zui終PH進行測定。 測定培養(yǎng)基pH的zui準(zhǔn)確的方法是使用pH計。使用前必須用已知pH的（通常PH 為4?7）標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液進行校準(zhǔn)。將pH計的電極用蒸餾水沖洗后浸入到燒杯的培養(yǎng)基中，就呵以從pH汁的刻度讀出培養(yǎng)基的pH。每個生產(chǎn)廠商對每種不同pH計都提供有 詳細的操作說明。

配制培養(yǎng)基時，使用帶機械攪拌的pH計可以很容易地調(diào)整pH培養(yǎng)基應(yīng)在能夠不停攪拌的荇器（如大燒杯）中配制，使用磁力攪拌器，磁力攪拃器帶有聚乙烯或聚四氟乙烯包裝的磁棒。含瓊脂的培養(yǎng)基需在融化后調(diào)整其pH，用可加熱的磁力攪拃器很容易辦到。調(diào)節(jié)pH時用巳知pH的標(biāo)準(zhǔn)緩沖液溶液先對pH計迸行 校準(zhǔn)。然后將復(fù)合電極和電阻溫度計（如果有）置于培養(yǎng)基屮，從燒杯遠離電極的一端緩 慢加入適量的鹽酸和氣氧化鈉，佴到培養(yǎng)基達到并保持所需的pH。

PH計的溫度補償應(yīng)考慮到溫度對電極系統(tǒng)的影響：在一些稀釋液和培養(yǎng)基中，pH隨溫度的變化而有相當(dāng)大的變化。對于液體培養(yǎng)基和稀釋液而言，pH通常既可以在 251:下,也可以在其使用時的溫度下調(diào)整和測定。

瓊脂培養(yǎng)基必須在溶解后進行PH的調(diào)整，溶解的溫度在45t:以上：因此，固體培養(yǎng) 基應(yīng)在其使用溫度確定pHt.這時應(yīng)使用平頭的復(fù)合電極，同吋用手動校準(zhǔn)PII計的溫度補償。在制備培養(yǎng)基時，若測定出培養(yǎng)基在熔化狀態(tài)和凝固狀態(tài)的pH有所不同時，說明 在調(diào)整pH時產(chǎn)生誤差。

同樣,制備的培養(yǎng)基在加熱滅菌處理（如高壓滅菌）時，也可能會產(chǎn)生PH的變化。對 于脫水培養(yǎng)某，生產(chǎn)廠商己考慮到這一點，通常不謠要再調(diào)整其pH但應(yīng)認真核對待用培養(yǎng)基的pH。如果脫水的瓊脂培養(yǎng)基在再次溶解或制備的過程中必須調(diào)整pH，那么zui 好在滅菌操作步驟之后用過濾滅菌的鹽酸和氫氧化鈉溶液進行調(diào)整，以避免造成因再次滅菌而形成的培養(yǎng)基的過度加熱。當(dāng)用不同的原料或藥品制備培養(yǎng)基時，必須在高壓滅菌后檢測培養(yǎng)基的pH。此外，如果發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基的pH在每次高壓滅菌后都發(fā)生相同變 化，可在配制培養(yǎng)基時對pH進行適當(dāng)調(diào)整。但仍需測定培養(yǎng)基滅菌后的zui終pH。