MSN交談
您所在位置：請輸入產(chǎn)品關鍵字：
郵編：201706
聯(lián)系人：陳剛
留言：在線留言
商鋪：http://www.kindlingtouch.com/st31156/
致瀉大腸埃希菌檢驗
點擊次數(shù)：517 發(fā)布時間：2013-11-29
一、增 菌
樣品采集后應盡快檢驗。除了易腐食品在檢驗之前應預冷藏外，一般不冷藏。
以無菌手續(xù)稱取檢樣25g，加在225ml營養(yǎng)肉湯中，以均質(zhì)器打碎1分鐘或用乳缽加滅菌砂磨碎。
取出適量，接種乳糖膽鹽培養(yǎng)基（測大腸菌群的培養(yǎng)基），以測定大腸菌群MPN，其余的移人500ml廣口瓶內(nèi)，于36℃土1℃培養(yǎng)6小時。 挑取l環(huán)，接種于1管30ml腸道菌增菌肉湯內(nèi)，于42℃培養(yǎng)18小時。 二、分 離
將乳糖發(fā)酵陽性的乳糖膽鹽發(fā)酵管和增菌液分別劃線接種麥康凱或伊紅美藍瓊脂平板；污染嚴重的檢樣，可將檢樣勻液直接劃線接種麥康凱
或伊紅美藍平板，于36℃±1℃培養(yǎng)18～24小時，觀察菌落。不但要注意乳糖發(fā)酵的菌落，同時也要注意乳糖不發(fā)酵和遲緩發(fā)酵的菌落。
三、生化試驗
1、自鑒別平板上直接挑取數(shù)個菌落分別接種三糖鐵瓊脂（TSI）或克氏雙糖鐵瓊脂（KI）。
同時將這些培養(yǎng)物分別接種蛋白胨水、半固體、pH7．2尿素瓊脂、KCN肉湯和賴氨酸脫羧酶試驗培養(yǎng)基。以上培養(yǎng)物均在36℃培養(yǎng)過夜。 2．TSI（三糖鐵瓊脂）斜面產(chǎn)酸或不產(chǎn)酸，底層產(chǎn)酸，H2S陰性，KCN陰性和尿素陰性的培養(yǎng)物為大腸埃希菌。
TSI（三糖鐵瓊脂）底層不產(chǎn)酸，或H2S、KCN、尿素有任意一項為陽性的培養(yǎng)物，均非大腸埃希菌。必要時做氧化酶試驗和革蘭染色。
四、血清學試驗
1、假定試驗 挑取經(jīng)生化試驗證實為大腸埃希菌的瓊脂培養(yǎng)物，
用◇
1致病性大腸埃希菌、◇2侵襲性大腸埃希菌和◇3產(chǎn)腸毒素大腸埃希菌多價O血清和◇4出血性大腸埃希菌O157血清做玻片凝集試驗。 當與某一種多價O血清凝集時，再與該多價血清所包含的單價O血清作試驗。如與某一個單價O血清呈現(xiàn)強凝集反應，即為假定試驗陽性。 2、證實試驗 制備O抗原懸液，稀釋至與Mac Farland3號比濁管相當?shù)臐舛取?nbsp;
原效價為1：160～1：320的O血清，用0.5％鹽水稀釋至1：40。稀釋血清與抗原懸液在10mm×75mm試管內(nèi)等量混合，作單管凝集試驗。 混勻后放于50℃水浴箱內(nèi)，經(jīng)16小時后觀察結(jié)果。如出現(xiàn)凝集，可證實為該O抗原。