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大鼠乳腺癌細胞；CHGF-003操作步驟

時間：2021/7/13閱讀：786

大鼠乳腺癌細胞；CHGF-003操作步驟：
）貼壁細胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量，使的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細胞瓶，終止作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃6~8小時(或隔夜)→液氮槽儲存。
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過小時，以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。

人腎足突細胞*培養(yǎng)基
人心房肌細胞*培養(yǎng)基
人心室肌細胞*培養(yǎng)基
人心肌成纖維細胞*培養(yǎng)基
人心臟微血管內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基
人主動脈內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基
人主動脈平滑肌細胞*培養(yǎng)基
人臍靜脈內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基
人臍動脈內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基
人臍靜脈平滑肌細胞*培養(yǎng)基
人臍動脈平滑肌細胞*培養(yǎng)基
人大隱靜脈平滑肌細胞*培養(yǎng)基
人冠狀動脈內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基
人腹膜毛細血管內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基
人髂動脈內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基
人血管內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基
人大隱靜脈內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基
人脈絡(luò)膜血管細胞*培養(yǎng)基

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大鼠乳腺癌細胞；CHGF-003操作步驟

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