ELSIA操作步驟復(fù)雜，影響反應(yīng)因素較多，LTA Elisa kit特別是固相載體的包被難達(dá)到各個(gè)體之間的*，因此在定量測(cè)定中，每批測(cè)試均須用一系列不同濃度的參考標(biāo)準(zhǔn)品在相同的條件下制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。測(cè)定大分子量物質(zhì)的夾心法ELISA，標(biāo)準(zhǔn)曲線的范圍一般較寬，曲線zui高點(diǎn)的吸光度可接近2.0，繪制時(shí)常用半對(duì)數(shù)紙，以檢測(cè)物的濃度為橫坐標(biāo)，以吸光度為縱坐標(biāo)，將各濃度的值逐點(diǎn)連接，所得曲線一般呈S形，其頭、尾部曲線趨于平坦，LTA Elisa kit中央較呈直線的部分是的檢測(cè)區(qū)域。

LTA Elisa kit技術(shù)操作要點(diǎn)：

1. 標(biāo)本的采取和保存。
2. 試劑的準(zhǔn)備
3. 加樣。
4. 保溫。
5. 洗滌。
6. 顯色和比色。
7. 酶標(biāo)比色儀。
8. 結(jié)果判斷。

將抗原或抗體固定在過程稱為包被(coating)。換言之，包被即是抗原或抗體結(jié)合到固相載體表面的過程。LTA Elisa kit蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過物理吸附結(jié)合的，靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團(tuán)與固相載體表面的疏水基團(tuán)間的作用于。這種物理吸附是非特異性的，受蛋白質(zhì)的分子量、等電點(diǎn)、濃度等的影響。載體對(duì)不同蛋白質(zhì)的吸附能力是不相同的，大分子蛋白質(zhì)較小分子蛋白質(zhì)通常含有更多的疏水基團(tuán)，故更易吸附到固相載體表面。IgG對(duì)聚苯乙烯等固相具有較強(qiáng)的吸附力，其聯(lián)結(jié)多發(fā)生在Fc段上，抗體結(jié)合點(diǎn)暴露于外，因此抗體的包被一般均采用直接吸附法。蛋白質(zhì)抗原大多也可采用與抗體相似的方法包被。當(dāng)抗原決定簇存在于或鄰近于疏水區(qū)域時(shí)，抗原與固相載體的直接吸附可使抗原決定簇不能充分暴露，在這種情況下，LTA Elisa kit直接包被效果不佳，可以采用間接的捕獲包被法，即先將針對(duì)該抗原的特異抗體作預(yù)包被，其后通過抗原抗體反應(yīng)使抗原固相化。此間接結(jié)合在固相上的抗原遠(yuǎn)離載體表面，其抗原決定簇也得以充分暴露。間接包被的抗原經(jīng)固相抗體的親和層析作用，包被在固相上的抗原純度大大提高，因此含雜質(zhì)較多的抗原也可采用捕獲包被法，試驗(yàn)的特異性、敏感性均由此得以改善，重復(fù)性亦佳。間接包被的另一優(yōu)點(diǎn)是抗原用量少，僅為直接包被的1/10乃至于/100。不易吸附在聚苯乙烯載體上的非蛋白質(zhì)抗原可采用特殊的包被方式。例如，在檢測(cè)抗DNA抗體時(shí)，需用DNA作為包被抗原，而普遍的固相載體一般不能直接與核酸結(jié)合。可將聚苯乙烯板先經(jīng)紫外線照射（例如30W紫外燈，75cm照射12小時(shí)），以增加其吸附性能。固相載體先用堿性蛋白質(zhì)，如聚賴氨酸、*等作預(yù)包被，也可提高核酸的結(jié)合力。也可用親和素*系統(tǒng)作間接包被，LTA Elisa kit即用親和素先包被載體，然后加入*化的DNA，這種包被方法均勻、牢固，已擴(kuò)大應(yīng)用于各種抗原物質(zhì)的定量測(cè)定。

脂類物質(zhì)無法與固相載體結(jié)合，可將其在有機(jī)溶劑（例如乙醇）中溶解后加入ELISA板孔中，開蓋置冰箱過夜或冷風(fēng)吹干，待酒精揮發(fā)后，讓脂質(zhì)自然干固在固相表面。抗心磷脂抗體的ELISA試劑一般采用這種包被方式。

LTA Elisa kit相關(guān)產(chǎn)品*：xyD965Hu    人肝受體同源物1(LRH1)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Liver ReHZptor Homolog 1 (LRH1)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyE389Hu    人囊泡單胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2(VMAT2)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Vesicular Monoamine Transporter 2 (VMAT2)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyE690Hu    人N-酰基乙醇胺酸酰化酶(NAAA)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for N-Acylethanolamine Acid Amidase (NAAA)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyF010Hu    人真核翻譯起始因子4A2(EIF4A2)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Eukaryotic Translation Initiation Factor 4A2 (EIF4A2)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyF723Hu    人DNA指導(dǎo)聚合酶γ1(POLγ1)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Polymerase DNA Directed Gamma 1 (POLg1)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyG095Hu    人磷脂酰肌醇結(jié)合網(wǎng)格蛋白裝配蛋白(PICALM)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Phosphatidylinositol Binding Clathrin Assembly Protein (PICALM)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyG202Hu    人氧化應(yīng)激誘導(dǎo)生長抑制因子1(OSGIN1)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Oxidative Stress InduHZd Growth Inhibitor 1 (OSGIN1)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyG347Hu    人B-Raf原癌基因*/*蛋白激酶(BRAF)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for B-Raf Proto Oncogene Serine/Threonine Protein Kinase (BRAF)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyG456Hu    人內(nèi)質(zhì)網(wǎng)氨肽酶2(ERAP2)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Endoplasmic Reticulum Aminopeptidase 2 (ERAP2)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyG782Hu    人甲狀腺轉(zhuǎn)錄因子1(TITF1)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Thyroid Transcription Factor 1 (TITF1)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyH009Hu    人腫瘤蛋白p53結(jié)合蛋白1(TP53BP1)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Tumor Protein p53 Binding Protein 1 (TP53BP1)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyH069Hu    人突觸囊泡蛋白樣蛋白2(SYTL2)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Synaptotagmin Like Protein 2 (SYTL2)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyH163Hu    人NAP關(guān)聯(lián)蛋白(SNAPAP)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for SNAP Associated Protein (SNAPAP)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyH343Hu    人副腫瘤抗原MA2(PNMA2)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Paraneoplastic Antigen MA2 (PNMA2)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyH838Hu    人異檸檬酸脫氫酶2(IDH2)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Isocitrate Dehydrogenase 2, mitochondrial (IDH2)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyH923Hu    人亨廷頓關(guān)聯(lián)蛋白1(HAP1)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Huntingtin Associated Protein 1 (HAP1)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyJ014Hu    人G蛋白α抑制活性多肽3(GNαI3)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for G Protein Alpha Inhibiting Activity Polypeptide 3 (GNaI3)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyJ081Hu    人葡萄糖-6-磷酸酶催化亞基(G6PC)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Glucose-6-Phosphatase, Catalytic (G6PC)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml