羥自由基測(cè)定試劑盒原理和顯色劑的配制方法！

產(chǎn)品名稱：    羥自由基測(cè)試試劑盒
英文名稱：    Hydroxyl Free Radical assay kit
產(chǎn)品規(guī)格：    50管/48樣
保存與運(yùn)輸：    按照說明書保存
應(yīng)用范圍：    科研用檢測(cè)試劑
比色法的基本原理是朗伯(Lambert)定律，闡述為：光被透明介質(zhì)吸收的比例與入射光的強(qiáng)度無關(guān)；在光程上每等厚層介質(zhì)吸收相同比例值的光。

一、測(cè)定原理

Fenton反應(yīng)是zui常見的產(chǎn)生羥自由基的化學(xué)反應(yīng)，H2O2的量和Fenton反應(yīng)產(chǎn)生的OH.量成正比，當(dāng)給予電子受體后，
用griess試劑顯色，形成紅色物質(zhì)，其呈色與OH.的多少呈正比關(guān)系。

二、試劑組成與配制：

試劑一：3%H2O2標(biāo)準(zhǔn)品儲(chǔ)備液0.5ml×1支，4℃保存3個(gè)月。0.03%標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)用液的配制：3%H2O2標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液：蒸餾水=1：99稀釋，現(xiàn)用現(xiàn)配。

試劑二：底物儲(chǔ)備液1ml×1支，4℃保存3個(gè)月。

底物應(yīng)用液的配制:

若您的樣本為產(chǎn)生羥自由基，即測(cè)定管吸光度比對(duì)照管吸光度低，則底物應(yīng)用液的配制：底物儲(chǔ)備液：蒸餾水=1：99稀釋，現(xiàn)用現(xiàn)配。
若您的樣本為產(chǎn)生羥自由基，即測(cè)定管吸光度比對(duì)照管吸光度高，則底物應(yīng)用液的配制：底物儲(chǔ)備液：蒸餾水=1：299稀釋，現(xiàn)用現(xiàn)配。

試劑三：甲液儲(chǔ)備液2ml×1支，4℃保存3個(gè)月，用時(shí)加蒸餾水1：9稀釋成應(yīng)用液。乙液7ml×2支，4℃保存3個(gè)月。

羥自由基測(cè)定試劑盒原理和顯色劑的配制方法！

試劑三應(yīng)用液的配制：甲液應(yīng)用液與乙液等比例混合，用多少配多少，余下4℃保存。

試劑四：液體10ml×1瓶，用時(shí)加蒸餾水稀釋至100ml，制備成應(yīng)用液，4℃保存。若有結(jié)晶，則放置37℃水浴至全部溶解后再稀釋。

試劑五：液體30ml×1瓶，避光4℃冰箱保存.

試劑六：液體30ml×1瓶，避光4℃冰箱保存.

試劑七：分析純的冰乙酸（冰醋酸）自備。

顯色劑的配制：試劑四應(yīng)用液：試劑五：試劑六：冰乙酸=8：3：3：2，需多少配多少，現(xiàn)用現(xiàn)配。

注：抑制羥自由基的物質(zhì)如：血清（漿）、各種組織勻漿液、口服液等；
產(chǎn)生羥自由基的物質(zhì)如：中性白細(xì)胞、某些藥物、部分植物等。
 

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