信帆生物為大家分享：血液樣本在收集的時候有哪些小技巧

全血根據(jù)收集的條件，分成不抗凝和抗凝兩種。同時，不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清；抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

標(biāo)本的存放溫度及時間，血清、血漿及細(xì)胞分離的方法步驟也是分析前影響檢驗(yàn)結(jié)果的重要因素。抽血后，血細(xì)胞因代謝需要，要消耗掉部分營養(yǎng)成分，故對這些成分進(jìn)行測定時，需及時地離心以分離掉細(xì)胞成分。

采血前個體的準(zhǔn)備情況，如空腹時間的長短、采樣時間的確定及采血時患者的姿勢；止血帶應(yīng)用時間，輸液情況，體育運(yùn)動，抗凝劑及穩(wěn)定劑的選用；標(biāo)本的處理等均可影響到某些檢驗(yàn)指標(biāo)的水平。故標(biāo)本采集過程應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)化，以zui大限度地減少分析前誤差。

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一、不抗凝收集血清：

1、無添加劑的干燥空管收集:

血管內(nèi)壁均勻涂有防止掛壁的藥劑(硅油)。它利用血液自然凝固的原理使血液凝固，等血清自然析出后，離心使用。主要用于血清生化(肝功、腎功、心肌酶、淀粉酶等)、電解質(zhì)(血清鉀、鈉、氯、鈣、磷等)、甲狀腺功能、藥物檢測、艾滋病檢測、腫瘤標(biāo)志物、血清免疫學(xué)檢測。
    亦可直接用干燥EP管收集全血，充分靜置使得紅細(xì)胞充分自然凝固后，離心分離出血清待用或保存。

2、用促凝管收集:

采血管內(nèi)壁均勻涂有防止掛壁的硅油，同時添加了促凝劑。促凝劑能激活纖維蛋白酶，使可溶性纖維蛋白變成不可溶性的纖維蛋白聚體，進(jìn)而形成穩(wěn)定的纖維蛋白凝塊，如果想快點(diǎn)出結(jié)果時，可采用促凝管。一般靜置半小時到1小時，直接離心分離出血清待用或保存,常用于急診生化。

3、含有分離膠及促凝劑的采血管收集：

管壁經(jīng)過硅化處理，并涂有促凝劑可加速血液的凝固，縮短檢驗(yàn)時間。管內(nèi)加有分離膠，分離膠與PET管具有很好的親和性，確實(shí)起到隔離作用，一般即使在普通離心機(jī)上，分離膠能將血液中的液體成分(血清)和固體成分(血細(xì)胞)*分開并積聚在試管中形成屏障。離心后血清中不產(chǎn)生油滴，主要用于血清生化(肝功、腎功、心肌酶、淀粉酶等)、電解質(zhì)(血清鉀、鈉、氯、鈣、磷等)、甲狀腺功能、藥物檢測、艾滋病檢測、腫瘤標(biāo)志物、血清免疫學(xué)。

    用促凝管的優(yōu)點(diǎn)：

①、加速紅細(xì)胞的凝固，無需長時間的靜置；

②、帶有分離膠，有效的將血清分離出來，更好的避免溶血；

    收集血清的缺點(diǎn)：

①、需要紅細(xì)胞的充分凝固，所需靜置時間較長；

②、分離出的血清相對較少，1ml全血不抗凝約只能分離出0.2-0.3ml血清。

二、抗凝收集血漿：

收集抗凝全血，輕輕顛倒充分抗凝后，可直接離心分離血漿待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征，選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及枸櫞酸鈉。

1、肝素抗凝：

zui常用的抗凝劑，一般情況下對相關(guān)指標(biāo)都不會有干擾，同時抗凝比例較大（抗凝劑：

全血=1:30），對血液基本沒有稀釋影響。

肝素是一種含有硫酸基團(tuán)的粘多糖，帶有強(qiáng)大的負(fù)電荷，具有加強(qiáng)抗III滅活絲

氨酸蛋白酶的作用，從而阻止的形成，并有阻止血小板聚集等多種抗凝作用。肝素管一般用于生化及血流變的檢測，是電解質(zhì)檢測的佳選擇，檢驗(yàn)血標(biāo)本中的鈉離子時，不能使用肝素鈉，以免影響檢測結(jié)果。也不能用于白細(xì)胞計(jì)數(shù)和分類，因肝素會引起白細(xì)胞聚集。

盡管用肝素的三種鹽抗凝所得電解質(zhì)濃度無顯著差別，但肝素鋰還是被認(rèn)為是的。這主要是人們認(rèn)為肝素鈉可使鈉的測定值偏高，肝素銨可使血氨測定值偏高（尿素酶法測定）。

肝素可抑制分子生物學(xué)中常用的一些工具酶，如限制性內(nèi)切酶、Taq酶等，可影響PCR

的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。可采用一些方法消除肝素的抑制效應(yīng)，如利用肝素酶，或在分離白細(xì)胞后用緩沖液洗滌白細(xì)胞兩次以上等。然而，許多實(shí)驗(yàn)工作者仍不愿意在進(jìn)行分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)時采用肝素作抗凝劑。

2、EDTA抗凝：

乙二胺四乙酸是一種氨基多羧基酸，可以有效地鰲合血液中的鈣離子，鰲合鈣會將鈣從

反應(yīng)點(diǎn)移走將阻止和終止內(nèi)源性或外源性凝血過程，從而防止血液凝固，與其他抗凝劑比較而言，其對血球的凝集及血細(xì)胞的形態(tài)影響較小，故通常使用EDTA鹽(2K、3K、2Na)作為抗凝劑。用于一般血液學(xué)檢查，不能用于血凝、微量元素及PCR檢查。
    由于EDTA會螯合重金屬離子，用該抗凝劑的話，部分帶有金屬離子的大分子酶都會有大量損失，具體看客戶測定的指標(biāo)來選擇，做血常規(guī)的話必須用EDTA抗凝。

   3、枸櫞酸鹽抗凝:

檸檬酸鈉通過作用于血樣中鈣離子鰲合而起抗凝作用，國家實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(NCCLS)推薦為3.2％或3.8％，抗凝劑與血比例為1：9，主要用于纖溶系統(tǒng)(原時間、時間、活化部分時間、纖維蛋白原)。采血時應(yīng)注意采足血量，以保證檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，采血后應(yīng)立即輕輕顛倒混勻5-8次。由于抗凝比例較小（抗凝劑：全血=1:9），對血液有一定的稀釋，一般不建議。

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