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大鼠細胞周期素D3(Cyclin-D3)elisa試劑盒

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更新時間:2015-12-10 10:01:57瀏覽次數:170次

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產品簡介

我公司*經營“大鼠細胞周期素D3(Cyclin-D3)elisa試劑盒"等elisa試劑盒及生物試劑、酶、細胞等生物化學試劑。各類產品齊全,價格實惠,質量有保證,并且可以提供免費代測,請您放心選購,咨詢!

詳細介紹

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大鼠細胞周期素D3(Cyclin-D3)elisa試劑盒應按照以下方式 操作:

1. 標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

320 ng/L

5號標準品

150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液

160 ng/L

4號標準品

150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液

80 ng/L

3號標準品

150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液

40 ng/L

2號標準品

150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液

20 ng/L

1號標準品

150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液

2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   

4. 配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用

5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。 

7. 溫育:操作同3                                     

8. 洗滌:操作同5

9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。

11. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

大鼠細胞周期素D3(Cyclin-D3)elisa試劑盒結果計算:

方法一: 以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;

方法二:用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,即為樣品的實際濃度。 

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