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單克隆抗體藥物是利用淋巴細胞雜交瘤或基因工程技術制備得到的藥物，是生物制藥領域的重要組成部分。在抗腫瘤方面，單克隆抗體藥物通過干預腫瘤發生發展中的信號通路，或激活機體對腫瘤的免疫反應，實現對腫瘤的靶向殺傷作用。與傳統化療藥物相比，單克隆抗體藥物表現出專一性強、療效顯著的特點，因此在腫瘤治療中起到重要作用。此外，單克隆抗體藥物還用于自身免疫、心血管、感染等疾病的治療。據有關資料顯示，2015 年單克隆抗體藥物的銷售額已達到 980 億美元左右，而同年中國的單抗藥物市場已經達到了 72 億人民幣，估計2020 年有望達到 200 億。

據美國 FDA 規定，對人體使用的單克隆抗體藥物，其臨床前及臨床試驗中需進行藥代動力學研究，包括藥物血漿濃度變化、體內分布和清除率等。然而，生物基質中單克隆抗體藥物的定量分析面臨巨大挑戰。如今對抗體藥物的檢測主要是采用 ELISA 試劑盒完成，但 ELISA 方法的缺點主要有開發時間長、準確性一般、假陽性率高、線性范圍窄。LC-MS/MS 方法可以很好地解決 ELISA 所存在的不足，而且靈敏度也滿足實際檢測需求，因此被越來越多地應用于抗體藥物的檢測。但是其前處理方法不成熟常常導致選擇性和重現性不佳。

納米表面分子導向限制性酶解（nSMOL, nano-Surface and Molecular Orientation Limited Proteolysis）技術通過對抗體藥物 Fab 區域選擇性酶解，獲得靶標蛋白特異性肽段，之后通過LC-MS/MS 方法對特異性肽段進行檢測，從而實現對抗體藥物的定量分析。nSMOL 技術能確保獲得靶標蛋白特異性肽段，同時盡可能降低樣品的復雜程度，從而表現出良好的選擇性和重現性。

島津公司作為的分析儀器綜合生產廠商，始終秉承創業宗旨“以科學技術向社會做貢獻”，不斷鉆研、滿足社會需求的科學技術。為了迎合客戶需求和行業發展趨勢，島津公司本應用文集，匯總了當前應用 nSMOL 技術在期刊上發表的研究論文，以及島津公司基于 nSMOL 技術開發的應用文章。

主要內容包括：

1. 基于nSMOL技術發表的SCI論文

Selective detection of complementarity-determining regions of monoclonal antibody by limiting protease access to the substrate: nanosurface and molecular-orientation limited proteolysis

The development of the validated LCMS bioanalysis of trastuzumab in human plasma using a selective detection method for complementarity determining regions of monoclonalantibodies: nano-surface and molecular orientation limited (nSMOL) proteolysis

Fully validated LCMS bioanalysis of Bevacizumab in human plasma using nano-surfaceand molecular-orientation limited (nSMOL) proteolysis

Application of nano-surface and molecular-orientation limited proteolysis to LC–MS bioanalysis of cetuximab

Validated LC–MS/MS analysis of immune checkpoint inhibitor Nivolumab in human plasma using a Fab peptide-selective quantitation method: nano-surface and molecular-orientation limited (nSMOL) proteolysis

Validated LC/MS Bioanalysis of Rituximab CDR Peptides Using Nanosurface and Molecular-Orientation Limited (nSMOL) Proteolysis.

2. 島津中國分析中心應用報告

nSMOL前處理技術結合Skyline軟件加速抗體藥物LCMS分析方法開發

基于nSMOL技術和Skyline軟件的曲妥珠單抗LC-MS/MS定量分析方法開發

nSMOL技術結合Skyline軟件對貝伐珠單抗藥物的UHPLC-MS/MS定量方法開發

采用nSMOL試劑盒建立人血漿中貝伐珠單抗定量分析方法的重現性驗證

nSMOL技術不同酶解緩沖體系對曲妥珠單抗靈敏度的影響

有關詳情，請您向“島津應用技術開發支持中心”咨詢。

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