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豐壽(上海)生物科技有限公司

通用ELISA試劑盒的操作等特點(diǎn)

時(shí)間:2016-1-27閱讀:401
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    本法不僅可以用來(lái)測(cè)定抗體,而且也可用于測(cè)定體液中的循環(huán)抗原,所以也是一種早期診斷的良好方法。在檢測(cè)抗DNA抗體時(shí),需用DNA作為包被抗原,而普遍的固相載體一般不能直接與核酸結(jié)合。換言之,包被即是抗原或抗體結(jié)合到固相載體表面的過(guò)程。當(dāng)抗原決定簇存在于或鄰近于疏水區(qū)域時(shí),抗原與固相載體的直接吸附可使抗原決定簇不能充分暴露,通用ELISA試劑盒在這種情況下,直接包被效果不佳,可以采用間接的捕獲包被法,即先將針對(duì)該抗原的特異抗體作預(yù)包被,其后通過(guò)抗原抗體反應(yīng)使抗原固相化。也可用親和素*系統(tǒng)作間接包被,即用親和素先包被載體,然后加入*化的DNA,這種包被方法均勻、牢固,已擴(kuò)大應(yīng)用于各種抗原物質(zhì)的定量測(cè)定。據(jù)已經(jīng)使用的結(jié)果,認(rèn)為法具有靈敏、特異、簡(jiǎn)單、快速、穩(wěn)定及易于自動(dòng)化。不僅適用于臨床標(biāo)本的檢查,而且由于一天之內(nèi)可以檢查幾百甚*千份標(biāo)本,因此,也適合于血清流行病學(xué)調(diào)查。

因此法在生物醫(yī)學(xué)各領(lǐng)域的應(yīng)用范圍日益擴(kuò)大,通用ELISA試劑盒可概括四個(gè)方面:
1、免疫酶染色各種細(xì)胞內(nèi)成份的定位。
2、研究抗酶抗體的合成。
3、顯現(xiàn)微量的免疫沉淀反應(yīng)。
4、定量檢測(cè)體液中抗原或抗體成份。

通用ELISA試劑盒載體的外形主要有三種:微量滴定板、小珠和小試管。固相載體在ELISA測(cè)定過(guò)程中作為吸附劑和容器,不介入化學(xué)反應(yīng)。板式及珠式ELISA的標(biāo)本量一般為100-200ul,而小試管可根據(jù)需要加大反應(yīng)體積,標(biāo)本反應(yīng)量的增加有助于試驗(yàn)敏感性的進(jìn)步。現(xiàn)在已有多種自動(dòng)化儀器用于微量滴定板型的ELISA檢測(cè),包括加樣、洗滌、保溫、比色等步驟,對(duì)操縱的尺度化極為有利。為便于作少量標(biāo)本的檢測(cè),有制成8聯(lián)孔條或12聯(lián)孔條的,放入座架后,大小與尺度ELISA板相同。聚苯乙烯經(jīng)射線照射后,其吸附機(jī)能特別是對(duì)免疫球蛋白的吸附機(jī)能增加,應(yīng)用于雙抗體夾心法可使固相上抗體量增多,但用于間接法測(cè)抗體時(shí)空缺值較大。也有應(yīng)用聚苯乙烯膠乳或其他材料制成的微粒作為ELISA試劑盒固相載體的。聚氯乙烯對(duì)蛋白質(zhì)的吸附機(jī)能比聚苯乙烯高,但空缺值也略高。聚苯乙烯通用ELISA試劑盒板因?yàn)樵系牟煌椭谱鞴に嚨牟顒e,各種產(chǎn)品的質(zhì)量差異很大,因此,每一批號(hào)的ELISA板在使用前須事先檢查其機(jī)能。

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