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豐壽(上海)生物科技有限公司

ELISA試劑盒的操縱步驟進行測定

時間:2016-1-20閱讀:518
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   在不同的固相載體上按預定的ELISA試劑盒,然后比較結果。小試管還可以當作比色杯,zui后直接放入分光光度計中比色。間接包被的抗原經固相抗體的親和層析作用,包被在固相上的抗原純度大大進步,因此含雜質較多的抗原也可采用捕捉包被法,試驗的特異性、敏感性均由此得以改善,重復性亦佳。聚苯乙烯具有較強的吸附蛋白質的機能,抗體或蛋白質抗原吸附其上后仍留存原來的免疫學活性,加之它的價格低廉,所以被普遍采用。ELISA試劑盒蛋白質與聚苯乙烯固相載體是通過物理吸附結合的,靠的是蛋白質分子結構上的疏水基團與固相載體表面的疏水基團間的作用力。控制反應前提,使各孔讀數在吸光度0.8左右。所有單個讀數與全部讀數的均數之差,應小于10%。例如,在檢測抗DNA抗體時,需用DNA作為包被抗原,而普遍的固相載體一般不能直接與核酸結合。

    ELISA板的特點是可以同時進行大量標本的檢測,并可在特制的比色計上迅速讀出結果。換言之,包被等于抗原或抗體結合到固相載體表面的過程。在哪一種載體上陽性結果與陰性結果差別zui大,這種載體就是這一ELISA測定項目的zui合適的固相載體。ELISA試劑盒試驗中,檢驗同一樣本達20次以上時,就會發現這組數據(指測定結果的吸光值)分布在均值兩側,大部分集中在均值附近。如果以測定值為橫坐標,以出現的頻率為縱坐標作圖,就可繪出一個呈鐘形的曲線圖。鐘頂處為均值,其他值以均值為中心對稱分布,這就是正態分布。

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