這些抗體就會與HEV 的多肽抗原結合，并固定在上面，洗板除去其它非特異性抗體和樣品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP（辣根過氧化物酶）酶結合物，經(jīng)第二次孵育后，酶結合物就會與*次孵育結合上的HEV IgM抗體相結合，洗板除去未結合的酶結合物，加入TMB底物溶液，通用ELISA試劑盒在第三次孵育時會發(fā)生酶-底物反應，只有那些含有HEVIgM抗體和酶結合物所形成的復合物的孔才會發(fā)生顏色變化，加入硫酸溶液終止酶和，并在波長: 450nm處測量O.D.值,測定血清中的某些酶，如CK，離體(采血)后很容易失活。失活的原因是酶活性中心的活性基因巰基(一SH)被氧化造成的。只有通過適當?shù)倪€原作用才能重新激活。如CK—NAC試劑盒即含有CK活化劑，名為N一乙酰半*。實驗研究證明，NAC對血清中已失活的CK活化過程約需180 S。這就是CK測定為什么要延遲時間較長的理論依據(jù)。

1 線性范圍變窄 現(xiàn)象：高值測不高。原因：生產(chǎn)試劑時有效成分投料量不足;試劑成份穩(wěn)定性較差。1.2 靈敏度變低現(xiàn)象：酶促反應速度曲線斜率下降，測定結果有嚴重系統(tǒng)誤差。通用ELISA試劑盒原因：試劑底物濃度不足。1.3 低值偏高 現(xiàn)象：試劑空白的變化曲線(吸光度VS時間)明顯波動。原因：試劑自身不穩(wěn)定，自行分解;工具酶純度不夠，雜酶含量超限，導致干擾作用。
2 樣品信息
樣品的溶血、脂血、黃疸等會對測定結果產(chǎn)生非化學反應的干擾。因此，應根據(jù)溶血、脂濁、黃疸的光譜吸收特性，采用雙波長或多波長的檢測模式，通用ELISA試劑盒并在結果計算中扣除因溶血、脂血、黃疸引起的影響，減少干擾程度。
3 測定范圍
每種待測物都有一個可測定的濃度或活性范圍，樣品結果若超過此范圍，分析儀將顯示結果超過范圍的提示。表示試劑已經(jīng)變質，應更換合格試劑。