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包被用抗原或抗體的濃度,ELISA試劑盒包被的溫度和時間,包被液的pH等應(yīng)根據(jù)試驗的特點和材料的性質(zhì)而選定。抗體和蛋白質(zhì)抗原一般采用pH9.6的碳酸鹽緩沖液作為稀釋液,也有用pH7.2的磷酸鹽緩沖液及pH7~8的Tris-HCL緩沖液作為稀釋液的。通常在ELISA板孔中加入包被液后,在4-8℃冰箱中放置過夜,37℃中保溫2小時被認為具有同等的包被效果。包被的zui適當(dāng)濃度隨載體和包被物的性質(zhì)可有很大的變化,每批材料需通過實驗與酶結(jié)合物的濃度協(xié)調(diào)選定。
ELISA試劑盒免疫實驗注意事項:
一、標(biāo)本收集體積 100μl 。當(dāng)天進行實驗標(biāo)本儲存在4℃?zhèn)溆谩?biāo)本2-8℃可以保存48小時;-20℃可以保存1個月,-70℃可以保存6個月。標(biāo)本避免反復(fù)凍融。
二、血清標(biāo)本采集避免溶血。紅細胞溶解時會釋放具有過氧化物酶活性物質(zhì),以HRP為標(biāo)記的ELISA測定中,溶血標(biāo)本可能會增加非特異性顯色。
三、標(biāo)本宜在新鮮時代測。保存時間過長的樣本可能發(fā)生聚合,ELISA實驗中會使本底加深。
四、反復(fù)凍融會使蛋白效價降低,樣本可以少量分裝保存或者適當(dāng)加入防腐劑。
五、如果您在購買我們公司試劑盒后操作中遇到任何特殊問題,敬請咨詢我司。
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