血清，指血液凝結(jié)后，在血漿中除去纖維蛋白原別離出的淡黃色通明液體或指纖維蛋白原已被除去的血漿。其主要作用是供給根本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、供給激素和各種成長(zhǎng)因子、供給結(jié)合蛋白、供給促觸摸和擴(kuò)展因子使細(xì)胞貼壁免受機(jī)械損害、對(duì)培養(yǎng)中的細(xì)胞的起到某些維護(hù)作用。那么應(yīng)該怎么正確凍結(jié)血清？咱們一起來(lái)看看吧
辦法一：將冷凍血清從-20℃取出后，放置于4℃冰箱中過(guò)夜。次日，將血清轉(zhuǎn)移到37℃的水浴中，搖動(dòng)瓶身以加速血清的溶解。
辦法二：直接將血清從-20℃取出后，放置于37℃水浴中，不斷搖晃瓶身使其加速凍結(jié)和混勻。
【注】：凍結(jié)過(guò)程中，如果不晃動(dòng)瓶身，當(dāng)溫度超越40℃的時(shí)分，血清可能會(huì)導(dǎo)致蛋白變性，析出沉積。凍結(jié)后不宜在37℃水浴長(zhǎng)期放置。
一：血清是否需求滅活？
關(guān)于大多數(shù)細(xì)胞的培養(yǎng)而言，是不需求的加熱滅活的。但在免疫學(xué)研究、ES細(xì)胞培養(yǎng)、昆蟲(chóng)細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)引薦運(yùn)用滅活血清。加熱血清能夠滅活血清中被激活的補(bǔ)體，但一起也會(huì)損壞熱不穩(wěn)定的蛋白。熱滅活血清對(duì)細(xì)胞的成長(zhǎng)只要細(xì)小的促進(jìn)作用，甚至?xí)捎跍缁畈划?dāng)，損壞血清的質(zhì)量，而按捺細(xì)胞的成長(zhǎng)。
二：血清滅活的方法？
依照正確的凍結(jié)方法*凍結(jié)血清，使其恢復(fù)到室溫。將血清分裝成50mL進(jìn)行滅活。關(guān)于一次需求滅活500mL的操作，能夠?qū)⒁粋€(gè)相同體積的容器放置在水浴鍋中，中心刺進(jìn)溫度計(jì)，作為參考。當(dāng)溫度到達(dá)56℃時(shí)，加熱30min進(jìn)行滅活。
【注】在血清的加熱和滅活過(guò)程中需求不斷地進(jìn)行搖晃混勻。
三：血清中含有的絮狀沉積是什么？
A:正常血清有時(shí)分中會(huì)出現(xiàn)一些絮狀的沉積，這些絮狀物一般是纖維蛋白和脂蛋白的沉積，不會(huì)影響血清的質(zhì)量，能夠通過(guò)在4℃混勻后靜置1h，400g離心5min去除。