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當(dāng)前位置:上海酶聯(lián)生物研究所>>技術(shù)文章>>小鼠ELISA試劑盒的新操作技術(shù)
ELISA試劑盒的種屬、指標(biāo)有很多,大家要根據(jù)實(shí)驗(yàn)來選擇,在準(zhǔn)備與實(shí)驗(yàn)的過程中也要小心操作。今天為大家?guī)砹诵碌募夹g(shù)內(nèi)容,下面我們解說小鼠ELISA試劑盒的新操作技術(shù)。
一、制備程序
1.酸化尿液或組織勻漿增加200萬鹽酸PH值3.5。允許坐在4°為15分鐘。離心機(jī)樣品中微量2分鐘去除沉淀。
2.編寫的C18反相柱洗10毫升乙醇其次是10毫升去離子水。
3.將樣品在一個輕微的正壓獲得流動率約0.5毫升/分鐘。ELISA試劑盒洗衣服柱用10毫升水,其次是10毫升的15%乙醇,zui后10毫升已烷。洗脫樣本欄添加10毫升乙酸乙酯。
4.如果分析是立即執(zhí)行,蒸發(fā)樣本下的氮流。至少添加250?信用分析緩沖區(qū)的干燥樣品。渦然后允許坐5分鐘的房間溫度。重復(fù)兩次。如果ELISA試劑盒分析是被延遲,如乙酸乙酯洗脫樣品溶液在-80°直到免疫是運(yùn)行。蒸發(fā)有機(jī)溶劑流下的氮在運(yùn)行前試驗(yàn)和重組如上。
二、ELISA試劑盒的保溫
在建立ELISA方法作反應(yīng)動力學(xué)研究時,實(shí)驗(yàn)表明,兩次抗原抗體反應(yīng)一般在37℃經(jīng)1~2小時,產(chǎn)物的天生可達(dá)。溫育常采用的溫度有43℃、37℃、室溫順4℃等。室溫溫育時要平置于操縱臺上即可。37℃是實(shí)驗(yàn)室中常用的保溫溫度,也是大多數(shù)抗原抗體結(jié)合的合適溫度。保溫的方式除有的ELISA儀器附有特制的電熱塊外,一般均采用水浴,可將ELISA板置于水浴箱中,ELISA板底應(yīng)貼著水面,使溫度迅速平衡。操縱時的室溫應(yīng)嚴(yán)格限制在劃定的范圍內(nèi),尺度室溫溫度是指20~25℃,但詳細(xì)操縱時可根據(jù)仿單的要求控制小鼠ELISA試劑盒的溫育。
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