ELISA試劑盒單克隆抗體制備時很多朋友會遇到這樣的問題，即咱們免疫用的蛋白為原核表達蛋白而意圖蛋白是真核蛋白或等，由于沒有規(guī)范品咱們做出來的抗體沒有辦法用規(guī)范品來驗證是否與其發(fā)作反響，終究導致咱們做出的是無用抗體。以下內(nèi)容為我公司試驗室技能總結(jié)的幾種辦法供咱們參閱，期望對咱們有所協(xié)助。

一、若要檢測抗原為某一細胞因子

ELISA試劑盒辦法：

1、通過超表達的辦法樹立安穩(wěn)表達的細胞系，留意要在意圖蛋白上加相應的標簽，以便純化。若僅僅是找到配對抗體則不需求純化甚至不需求樹立安穩(wěn)表達的細胞系瞬時轉(zhuǎn)染就可完成，若要進一步作出規(guī)范曲線請純化。

2、 將細胞系樹立后，咱們就可以拿到規(guī)范品了，做配對作業(yè)就相應簡略。

3、若該種細胞因子可有某種陽性影響物很多影響而來，也可不做細胞系。用陽性影響物影響，咱們細胞影響物的上清液來做規(guī)范品也可。

二、若要檢測的抗原為某種新的
ELISA試劑盒辦法：

1、很多做出某個蛋白的單克隆抗體；

2、很多收集疑似感染動物或人血液，用PCR的辦法進一步斷定每份血液是否真的存在；

3、將你做出的很多抗體中的一個做符號作為符號抗體，其他一切抗體作為包被抗體，檢測第二步中斷定陽性的血清，成果與陰性血清做比照，并畫出點狀分布圖。若陽性血清大部分的點在陰性血清之上祝賀你找到配對抗體了；若成果相差不大，請從頭符號一株抗體做相同試驗。